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            賽爾瑞成(北京)生命科學技術有限公司
            中級會員 | 第8年
            淺述重組蛋白純化常用的幾種方法2022/08/16
            重組蛋白純化要利用不同蛋白間內(nèi)在的相似性與差異,利用各種蛋白間的相似性來除去非蛋白物質(zhì)的污染,而利用各蛋白質(zhì)的差異將目的蛋白從其他蛋白中純化出來。每種蛋白間的大小、形狀、電荷、疏水性、溶解度和生物學活性都會有差異,利用這些差異可將蛋白從混合物如大腸桿菌裂解物中提取出來得到重組蛋白。重組蛋白純化常用的幾個方法如下:1.親和純化色譜:根據(jù)蛋白與色譜基質(zhì)上偶聯(lián)的特異性配體間的可逆性相互作用分離蛋白。該技術對目的蛋白具有高選擇性、高分辨率和高容量。純化回收率通常較高。2.離子交換色譜:不同蛋白質(zhì)的等電點
            重組蛋白原核表達服務-賽爾瑞成2022/08/09
            E.coli(大腸桿菌)作為一個用于重組蛋白生產(chǎn)的表達宿主菌,它不僅具有遺傳背景清楚、培養(yǎng)操作簡單、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)導效率高、生長繁殖快、成本低廉,可以快速大規(guī)格地生產(chǎn)目的蛋白等優(yōu)點,而且其表達外源基因產(chǎn)物的水平遠高于其它基因表達系統(tǒng)。利用原核系統(tǒng)進行重組蛋白的研發(fā)和生產(chǎn)是賽爾瑞成(CRGEN)的優(yōu)勢之一,賽爾瑞成(CRGEN)擁有豐富的E.coli蛋白表達、蛋白復性、蛋白純化的經(jīng)驗,能為客戶提供細胞因子、免疫用抗原、檢測抗原、單鏈抗體、納米抗體、信號通路蛋白、病毒樣顆粒蛋白(VLP)等一系列蛋白的開發(fā)
            重組人纖維連接蛋白的三個主要功能2022/08/03
            纖維連接蛋白廣泛存在于組織和組織液(細胞外基質(zhì))中的一種高分子量糖蛋白,由兩個亞基通過C末端的二硫鍵交聯(lián)形成,每個亞基的分子量為220~250kDa,每個亞基由多個功能結(jié)構(gòu)域組成,可與血纖連蛋白、肝素、膠原、DNA以及細胞表面受體等結(jié)合。重組人纖維連接蛋白是以單體形式存在,可作為一種細胞培養(yǎng)基質(zhì),替換血源纖連蛋白等,提高細胞貼壁率,增強細胞代謝水平,縮短細胞生長周期。另外也可直接添加到培養(yǎng)基中,可替換或降低血清使用量,促進細胞貼壁、遷移、移動生長、維持細胞狀態(tài)。本品以凍干粉形式供貨,已達到細胞培
            賽爾瑞成GMP級高品質(zhì)細胞因子:IL15/IL2/IL4/IL6..2022/07/28
            賽爾瑞成技術團隊常年從事抗體和重組蛋白的開發(fā)工作,曾承擔國家“863”計劃項目、國家重大新藥創(chuàng)制項目、國家自然科學基金項目、省級科技攻關計劃項目等,每年為客戶提供200多種重組蛋白和重組抗體定制服務。目前,賽爾瑞成已研發(fā)出幾十種高品質(zhì)重組細胞因子,均是在符合GMP標準要求的潔凈間內(nèi)制備、質(zhì)檢、包裝,產(chǎn)品均具有高純度95%,高活性,低內(nèi)毒素GMP條件生產(chǎn)|ISO9001、ISO13485質(zhì)量體系雙認證|重組表達工藝高純度95%│高活性│低內(nèi)毒素重組人白介素15(RecombinantHumanIL
            賽爾瑞成GMP級高品質(zhì)細胞因子:EGF/bFGF/BMP4/SCF..2022/07/27
            賽爾瑞成技術團隊常年從事抗體和重組蛋白的開發(fā)工作,曾承擔國家“863"計劃項目、國家重大新藥創(chuàng)制項目、國家自然科學基金項目、省級科技攻關計劃項目等,每年為客戶提供200多種重組蛋白和重組抗體定制服務。目前,賽爾瑞成已研發(fā)出幾十種高品質(zhì)重組細胞因子,均是在符合GMP標準要求的潔凈間內(nèi)制備、質(zhì)檢、包裝,產(chǎn)品均具有高純度95%,高活性,低內(nèi)毒素GMP條件生產(chǎn)|ISO9001、ISO13485質(zhì)量體系雙認證|重組表達工藝高純度95%│高活性│低內(nèi)毒素重組人白介素15(RecombinantHumanIL
            細胞凍存液存放環(huán)境,有一定的要求2022/07/27
            細胞凍存是將細胞儲存在低溫環(huán)境中,減少細胞代謝,實現(xiàn)長期儲存的一種技術。在大多數(shù)細胞系中,細胞會隨著衰老和演化不斷的積累改變,造成表型和基因型的“培養(yǎng)漂移”,在凍存過程中,適當?shù)牟僮骱秃线m的凍存條件可以減少細胞特性的改變或丟失,起到細胞保種的作用。細胞凍存液的主要功能就是防止冷凍過程中形成會損傷細胞的冰晶,同時在長期冷凍和解凍過程中為細胞提供支持成分。通用于各種動物細胞株,凍存細胞可在80°C長期保存5年,細胞凍存液配方成分明確,不含動物來源性蛋白,不含血清,可減少各類細菌、病毒和支原體等污染,
            怎樣使用重組人白介素4才是對的呢2022/07/05
            重組人白介素4細胞因子是免疫原、絲裂原或其他刺激劑誘導多種細胞產(chǎn)生的低分子量可溶性蛋白質(zhì),具有調(diào)節(jié)固有免疫和適應性免疫、血細胞生成、細胞生長以及損傷組織修復等多種功能。細胞因子可被分為白細胞介素、干擾素、腫瘤壞死因子超家族、集落刺激因子、趨化因子、生長因子等。眾多細胞因子在體內(nèi)通過旁分泌、自分泌或內(nèi)分泌等方式發(fā)揮作用,具有多效性、重疊性、拮抗性、協(xié)同性等多種生理特性,形成了十分復雜的細胞因子調(diào)節(jié)網(wǎng)絡,參與人體多種重要的生理功能。重組人白介素4使用流程:1、本品低溫取出回溫至室溫,開瓶前先短暫離心
            細胞凍存液的選擇要遵循什么原則呢2022/06/16
            細胞凍存液使用的原理:細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以最大限度的保存細胞活力。如今細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少細胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復蘇細胞應采用快速融化的方法,這樣可以保證細胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細胞造成損傷。細胞凍存液產(chǎn)品特點:1.配方明確,不含血清、不含動物來源性蛋白,可減少各類細菌、病毒和支
            精品推薦|三款無血清細胞凍存液,給您提供更多選擇!2022/06/13
            細胞凍存是細胞培養(yǎng)技術中細胞進行保種并長期保存的常用方法,其中細胞凍存液,作為細胞凍存時必須使用的一種溶液,不僅僅是說只是用來進行細胞的保存,在細胞的購買、寄贈、交換和運送過程中也起著關鍵作用,因此選擇一款好的細胞凍存液就尤為重要。傳統(tǒng)細胞凍存液是向培養(yǎng)基中加入保護劑,一般是10%二甲基亞砜(DMSO)和10%-90%的牛血清。傳統(tǒng)細胞凍存液凍存細胞時遇到的問題總結(jié)如下:1.需要程序降溫(4℃→-20℃→-80℃→液氮),步驟繁瑣,耗時耗力;2.含血清,細胞污染(病毒、霉菌和支原體等)的風險更高
            重組人白細胞介素2主要可以用來做什么呢?2022/06/06
            白細胞介素現(xiàn)在是指一類分子結(jié)構(gòu)和生物學功能已基本明確,具有重要調(diào)節(jié)作用而統(tǒng)一命名的細胞因子。白細胞介素在傳遞信息,激活與調(diào)節(jié)免疫細胞,介導T、B細胞活化、增殖與分化及在炎癥反應中起重要作用。重組人白細胞介素2是由多細胞來源,又具有多向性作用的細胞因子;對機體的免疫應答和抗病毒感染等有重要作用。其主要作用為:刺激免疫系統(tǒng)活性,促進免疫細胞增殖。刺激自然殺傷細胞的增殖與活化、并增強其活性;誘導細胞毒性淋巴細胞,增強其溶細胞活性;誘導淋巴因子活化殺傷細胞,此細胞具有廣譜的抗腫瘤活性,可以溶解多種腫瘤細
            想知道更多的真核表達細胞優(yōu)點,來本文可以看到2022/05/23
            真核表達細胞的優(yōu)點:重組DNA易轉(zhuǎn)染,遺傳穩(wěn)定,可重復;識別和去除內(nèi)含子;進行翻譯后修飾;磷酸化、糖基化、二硫鍵、寡聚體等的形成、高級結(jié)構(gòu)的正確折疊;產(chǎn)品的構(gòu)型正確率高,可被改造成類人體源性,免疫源性好;可分泌至培養(yǎng)基,提純工藝簡單,成本低;可用于基因治療。細胞表達系統(tǒng)能誘導高效表達,對表達的蛋白進行正確折疊,并進行復雜糖基化修飾,蛋白活性接近于天然蛋白,不需去除內(nèi)毒素,周期較長,操作復雜,需要細胞房,無菌,成本投入高。真核表達細胞載體趨向于既有利于擴增目的基因又有利于篩選陽性克隆的載體的構(gòu)建。
            哺乳動物細胞真核表達系統(tǒng)的瞬時表達是通過轉(zhuǎn)染試劑完成的2022/05/11
            哺乳動物細胞真核表達系統(tǒng)能表達天然結(jié)構(gòu)完整的重組蛋白,是廣泛應用的人類復雜糖基化蛋白的表達系統(tǒng),生物活性接近于天然蛋白質(zhì),是活性蛋白因子及各類受體蛋白的表達系統(tǒng),在生物制藥領域應用較廣,60%以上的的藥用蛋白產(chǎn)品由哺乳動物細胞表達系統(tǒng)獲得。哺乳動物細胞瞬時轉(zhuǎn)染能在短期內(nèi)快速表達高活性蛋白,滿足蛋白制備的需求。哺乳動物細胞真核表達系統(tǒng)是通過脂質(zhì)體或者是PEI的等轉(zhuǎn)染試劑在體外通過和質(zhì)粒形成復合體,將質(zhì)粒導入細胞后進行瞬時表達。稱為瞬時表達的原因是因為質(zhì)粒在真核細胞中不能擴增。并且不斷被細胞所降解,
            真核細胞重組蛋白表達及純化服務各種蛋白的純化技巧2022/04/22
            真核細胞重組蛋白表達及純化服務各種蛋白的純化技巧:天然大分子蛋白分離純化:結(jié)合待分離的蛋白理化性質(zhì),適當選用適合孔徑的分子篩截留分離純化,配合陰離子柱或陽離子柱,使用HLPC分離設備,收取洗脫峰,可以獲得純度95%以上的天然蛋白。天然小肽分離純化:通過分子篩初步截留大分子蛋白,使用大孔樹脂或反向樹脂純化小分子化合物,進一步通過HPLC和MS對小肽分子鑒定,由于小肽分子一般含量較低,獲得的蛋白量較少。未知蛋白混合物分離純化:客戶需告知帶分離蛋白的基本特性,由鐘鼎分離純化,最終通過質(zhì)譜鑒定,活性鑒定
            哺乳動物瞬時表達受體細胞應具備的條件2022/04/11
            哺乳動物瞬時表達廣泛地應用于基因產(chǎn)物的快速表達及蛋白質(zhì)的小規(guī)模制備等方面。細胞瞬時轉(zhuǎn)染表達能夠快速靈活的制備重組蛋白,細胞在轉(zhuǎn)染后合適時機即能可收獲并進行分析.在瞬時轉(zhuǎn)染中,重組DNA導入感染性強的細胞系以獲得目的基因暫時高水平的表達。轉(zhuǎn)染的DNA不必整合進宿主染色體,當有大量樣品需要在短時間內(nèi)分析時,尤其是在轉(zhuǎn)染后1到4天內(nèi)收獲細胞,所得溶解產(chǎn)物用于檢測目的基因的表達時,可以采用瞬時轉(zhuǎn)染的方式。哺乳動物瞬時表達適用于生成具有天然結(jié)構(gòu)和活性的哺乳動物蛋白的選用表達平臺,可以實現(xiàn)高水平的翻譯后加工
            *|重組蛋白大腸桿菌原核表達培養(yǎng),也可以這么簡單、高效!2022/04/11
            大腸桿菌高效表達全線產(chǎn)品買贈活動買2瓶500mL賽多培™大腸桿菌表達培養(yǎng)基,送1瓶500mL大腸桿菌專用破菌液+1支25KU超級核酸酶;活動日期:即日起至2022.06.30對于進行重組蛋白原核表達方面研究的小伙伴們,總會遇到各種各樣的問題,比如IPTG誘導劑的添加量、誘導時間、收集到的菌量少或者蛋白表達量少、如何破菌收集蛋白,如何去除核酸殘留等等,賽爾瑞成在大腸桿菌原核表達方向積累了豐富的經(jīng)驗,可以提供一整套大腸桿菌原核表達的解決方案,讓大腸桿菌重組蛋白表達更簡單、更高效!可見下圖賽爾瑞成大腸
            新品|大腸桿菌表達培養(yǎng)基+大腸桿菌專用破菌液,讓蛋白表達更簡單!2022/04/02
            賽多培TM大腸桿菌表達培養(yǎng)基CesuperTME.coliExpressionMedium產(chǎn)品簡介賽多培TM大腸桿菌表達培養(yǎng)基是賽爾瑞成研發(fā)的一種適合于大腸桿菌生長和蛋白表達的即用型全成分培養(yǎng)基。使用該培養(yǎng)基,只需一步操作,無需添加IPTG誘導劑,即可收獲含表達蛋白的菌體,與常規(guī)方法相比,對絕大多數(shù)蛋白表達,其菌體生物量和對應的目的蛋白都明顯提高數(shù)倍以上。產(chǎn)品優(yōu)勢1.操作簡單,提高效率直接挑取單菌落或用甘油菌接種,一步操作,然后培養(yǎng)過夜或培養(yǎng)至平臺期收菌,中間不用監(jiān)測生長狀態(tài)(監(jiān)測OD值),不用
            重組人TSLP試驗操作流程是怎樣的2022/03/23
            重組人TSLP實驗原理:用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗TSLP抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗TSLP抗體、HRP標記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的TSLP呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。重組人TSLP試驗操作流程:實驗前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度
            重組蛋白表達純化常用標簽選擇指南2022/03/11
            蛋白標簽(proteintag)是指與目的蛋白一起融合表達的一段多肽(包括小肽)或者蛋白,其作用是便于目的蛋白的表達、純化、檢測和示蹤等。過去數(shù)十年,研究人員相繼發(fā)現(xiàn)和開發(fā)出了具有各種不同功能的蛋白標簽,已在基礎研究和產(chǎn)業(yè)化產(chǎn)品生產(chǎn)等方面得到了廣泛的應用。實際上,任何一個蛋白或多肽只要其具有促進表達、便于純化或檢測等功能,都可以成為另一個蛋白或多肽的標簽(或標簽蛋白)。所以文獻報道可以當做標簽使用的蛋白或多肽超過數(shù)百種之多。但是,根據(jù)使用的廣泛程度和通用性衡量,常用的蛋白標簽并不多。如上文所述,
            重組蛋白真核表達系統(tǒng)對蛋白質(zhì)表達有決定性影響的因素是什么?2022/03/10
            重組蛋白真核表達包括酵母表達系統(tǒng)、桿狀病毒-昆蟲細胞表達系統(tǒng)、腺病毒表達系統(tǒng)等。一般能正確折疊,含有各種修飾。但價格高,周期長。基因表達是指細胞把儲存在DNA序列中遺傳信息經(jīng)過轉(zhuǎn)錄和翻譯,最終轉(zhuǎn)變成具有生物活性的蛋白質(zhì)分子。重組蛋白的應用用于結(jié)構(gòu)研究時,重組蛋白的表達要求正確的蛋白質(zhì)折疊、形成正確的二硫鍵、均一的重組產(chǎn)物。每種表達系統(tǒng)的蛋白質(zhì)折疊和二硫鍵形成的內(nèi)在能力。不均一性的潛在來源包括鱗酸化、甲硫氣酸氣膚酶對起始甲硫氨酸的低效切割以及糖基化。不幸的是,不均一的磷酸化常見于重組蛋白激酶的表達
            對于重組人GDF3檢測流程你是否清楚2022/01/20
            重組人GDF3試劑盒具有的三種特性:靈敏度:最小的GDF-3檢測濃度小于30pg/ml。特異性:可同時檢測重組或天然的人GDF-3。不與人其它細胞因子有交叉反應。重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。重組人GDF3其要求有哪些:1.生物活性:進行相應的體外或體內(nèi)活性檢測。2.純度:應用兩種方法分析產(chǎn)品純度。3.真實性:重組蛋白產(chǎn)品一致經(jīng)過N末端氨基酸序列分析;必要時應用SDS-PAGE,RP-HPLC和質(zhì)譜(MS)檢測其真實性。4.內(nèi)毒素:kineticLAL法檢測內(nèi)毒素。5.蛋白含量:通過紫
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