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            大鼠血管緊張素Ⅱ受體1抗體elisa試劑盒檢測(cè)說(shuō)明(XY)

            來(lái)源:上海信裕生物科技有限公司   2012年09月24日 09:11  

            使用目的:
              本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中血管緊張素受體1抗體(ATⅡR1)含量。
            實(shí)驗(yàn)原理
              本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠血管緊張素受體1抗體(ATⅡR1)水平。用純化的大鼠血管緊張素受體1(ATⅡR1)抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入大鼠血管緊張素受體1抗體(ATⅡR1),再與HRP標(biāo)記的血管緊張素受體1(ATⅡR1)抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管緊張素受體1抗體(ATⅡR1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠血管緊張素受體1抗體(ATⅡR1)濃度。 
            elisa試劑盒組成 
            1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 終止液 6ml×1
            酶標(biāo)試劑 6ml×1瓶 標(biāo)準(zhǔn)品(800pg/ml) 0.5ml×1
            酶標(biāo)包被板 12×8條 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1
            樣品稀釋液 6ml×1瓶 10 說(shuō)明書(shū) 1
            顯色劑A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2張 
            顯色劑B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1個(gè)
            elisa試劑盒標(biāo)本要求 
            1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
            2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
            elisa試劑盒操作步驟
            標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
            加樣:分別設(shè)空白孔空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
            溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 
            配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
            洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
            加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。 
            溫育:操作同3。
            洗滌:操作同5。
            顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
            終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色
            測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
            上海信裕生物科技有限公司http://www.shxykit.com是一家生物*企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷(xiāo)售。并代理銷(xiāo)售、、、等二十多家國(guó)外,致力于為廣大高校、科研院所和企事業(yè)單位提供*的科研試劑和完善的技術(shù)服務(wù),滿足生物化學(xué)、分子生物學(xué) 、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué) 試劑盒等生物科技實(shí)驗(yàn)需求。

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