皖儀離子色譜法測定多肽中的哌啶
關(guān)鍵詞：離子色譜；多肽；合成；哌啶；方法學。
引言
哌啶是一種含有兩個碳和一個氮的環(huán)狀有機化合物。在多肽合成中，哌啶主要是作為一個結(jié)構(gòu)單元或一個反應的底物存在。哌啶在多肽合成中起到了多種作用，從結(jié)構(gòu)單元到保護基團，再到反應底物和優(yōu)化反應條件。哌啶在最終合成的多肽中有所殘留，而哌啶具有毒性，是一種升壓劑，因此必須控制最終產(chǎn)物的哌啶殘留量。皖儀開發(fā)了一種離子色譜測試方法檢測多肽中哌啶的含量，樣品前處理操作簡單，測試準確性高，重復性良好，與其他組分間分離度良好，可以滿足客戶大規(guī)模測試的要求，并且提高時效性，測試結(jié)果一致性，減少人為及系統(tǒng)誤差。
1、實驗方法
1.1 測試條件儀器：
IC6600系列離子色譜儀配置電導檢測器
圖為IC6600系列多功能離子色譜儀
色譜柱：MS-5C-P1陽離子色譜柱（4.6mm×250mm）；
保護柱：陽離子保護柱（30 mm×4 mm）；
柱溫：30℃；
流速：1.0ml/min；
進樣量：25μL；
檢測器：電導檢測器。
1.2 使用試劑標樣：哌啶標準樣品（客戶提供的純哌啶）
1.3 標準溶液制備標準原液的制備：稱量0.100g純哌啶移至100mL容量瓶用純水定容至刻度線。
標準樣品工作液:分別吸取0.002mL、0.005mL、0.01mL、0.02mL、0.05mL、0.08mL和0.10mL母液(1000mg/L)于10mL容量瓶中,用超純水定容至刻度,配得哌啶質(zhì)量濃度為0.2mg/L、0.5mg/L、1mg/L、2mg/L、5mg/L、8mg/L和10mg/L的混合標準工作液。臨用現(xiàn)配。
表1標準系列曲線濃度梯度表
2、測試結(jié)果
2.1 哌啶線性測試結(jié)果
依次移取0.2mg/L、0.5mg/L、1mg/L、2mg/L、5mg/L、8mg/L和10mg/L的系列標準工作曲線工作液，按照1.1工作測試條件得到標準曲線多點重疊圖如圖1，哌啶在該色譜條件下線性相關(guān)系數(shù)R=0.999以上，線性良好。
圖1 哌啶標準曲線重疊色譜圖
表2線性方程
2.2 樣品譜圖
在1.1的工作測試條件下條件下，對樣品進行檢測。樣品圖譜如圖2所示樣品圖譜中的目標哌啶離子峰形對稱，分離度良好，最終得到樣品中哌啶的含量。樣品中哌啶含量為2.283mg/L，樣品重復性良好樣品RSD在0.301％，符合客戶需求。
圖2 樣品測試譜圖
3、總結(jié)
本次采用皖儀科技離子色譜儀IC6600系列對樣品中的哌啶進行標準曲線驗證、重復性驗證。測試結(jié)果峰形較好，線性良好，重復性滿足要求，靈敏度高完全滿足測試要求。
7
立即詢價
您提交后，專屬客服將第一時間為您服務