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小鼠心肌細(xì)胞使用方法和注意事項(xiàng)
小鼠心肌細(xì)胞分離自小鼠胚胎心臟組織，細(xì)胞呈多邊形等不規(guī)則形狀，2天以后大部分伸出偽足呈巴掌狀部分心肌細(xì)胞會出現(xiàn)搏動，成熟的心肌細(xì)胞增殖緩慢或不增殖。體外培養(yǎng)的小鼠心肌細(xì)胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。小鼠心肌細(xì)胞采用混合酶解法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶，細(xì)胞純度可達(dá)80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
小鼠心肌細(xì)胞使用方法：
1.取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3.細(xì)胞傳代
1)吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2)添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4)待細(xì)胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
小鼠心肌細(xì)胞注意事項(xiàng)：
1.培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月
2.在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作
3.傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時(shí)間不宜過長，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)
4.該細(xì)胞只可用于科研