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細(xì)胞培養(yǎng)中的各種問題解答
細(xì)胞培養(yǎng)中的各種問題解答
在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中，或許你會有一系列的問題想要問。今天為大家整理了一些關(guān)于細(xì)胞的常見問題解答。
一、細(xì)胞成長曲線測守時為什么要做重復(fù)孔？
答：測定細(xì)胞成長曲線細(xì)胞計數(shù)時挑選 3 個復(fù)孔，每孔分別計三次，取其平均值，目的是減小操作差錯。
二、為什么制作的細(xì)胞成長曲線沒有到達(dá)平臺期？
答：可能有以下原因：一是細(xì)胞接種密度過低；二是細(xì)胞培育時刻過短；三是細(xì)胞成長狀況欠好，使其不能正常增殖。
三、怎么挑選細(xì)胞接種數(shù)？
答：可根據(jù)細(xì)胞傳代培育過程中接種數(shù)及細(xì)胞成長周期進(jìn)行核算，細(xì)胞接種數(shù)因細(xì)胞的不同而不同。
四、細(xì)胞計數(shù)時為什么要用臺盼藍(lán)染色？
答：參加臺盼藍(lán)后，活細(xì)胞不上色，臺盼藍(lán)上色的細(xì)胞呈深藍(lán)色，是不健康或已死亡的細(xì)胞，不能計數(shù)。
五、測定細(xì)胞成長曲線的含義是什么？
答：細(xì)胞成長曲線是測定細(xì)胞肯定成長數(shù)的常用辦法，也是斷定細(xì)胞生機(jī)的重要目標(biāo)，是培育細(xì)胞生物學(xué)特性的基本參數(shù)。由于細(xì)胞太小，無法測單個細(xì)胞的成長狀況，所以測細(xì)胞集體的成長曲線。
六、細(xì)胞成長曲線測定周期是幾天？
答：一般是一個星期。
七、細(xì)胞成長曲線還有其他辦法制作嗎？
答：當(dāng)然有。我們說到zui多的是直接計數(shù)的辦法，除此以外還有相對計數(shù)的辦法，該類辦法首先要制作規(guī)范曲線，標(biāo)定細(xì)胞數(shù)和某個變量的函數(shù)，然后我們只需要測定每天這個變量的值便能夠核算出細(xì)胞數(shù)。常用的是 MTT、CCK8 等比色的辦法。
八、為什么細(xì)胞計數(shù)多天，細(xì)胞數(shù)沒有添加反而削減？
答：一般細(xì)胞傳代后，會有一個成長緩慢的潛伏期，細(xì)胞不增殖，而細(xì)胞會有正常的死亡，故細(xì)胞數(shù)不添加反而削減。