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大腸桿菌O157:H7增菌鑒別肉湯

原理

March和Ratnam報(bào)告(1)大腸桿菌O157：H7不能發(fā)酵山梨醇，因而開發(fā)了山梨醇麥康凱培養(yǎng)基。隨后，Thomson（2）等人觀察到了大腸桿菌O157：H7缺乏β-葡萄糖醛酸酶活性。

加入的亞碲酸鹽（貨號FD230）使培養(yǎng)基更具有特異性和選擇性。培養(yǎng)基含有的顯色劑可檢測β-葡萄糖醛酸酶和β-半乳糖苷酶活性。陽性則為藍(lán)色菌落。但大腸桿菌O157：H7為紫色菌落，因其缺少β-葡萄糖醛酸酶且不能發(fā)酵山梨醇。

培養(yǎng)基組成

成分                  G/L

酪蛋白酶解物   10.000

山梨醇             10.000

混合膽鹽          1.500

顯色混合劑       1.300   

終pH(25°C)   7.1±0.2

配制

11.4 g溶于500 ml 蒸餾水，加熱使*溶解。高壓滅菌。要選擇性分離大腸桿菌O157，可無菌加入復(fù)溶的添加劑（貨號FD230），混勻后傾注平板。

培養(yǎng)結(jié)果

35-37°C，18-24小時(shí)后觀察如下：

大腸桿菌——藍(lán)色，可能顯示輕微的生長沉淀。若培養(yǎng)基含F(xiàn)D230，則生長受抑。

大腸桿菌O157:H7——深紫色至洋紅色，不受FD230影響。

阪崎氏腸桿菌——白色，可能顯示輕微的生長沉淀。若培養(yǎng)基含F(xiàn)D230，則生長受抑。

肺炎克雷伯氏菌——藍(lán)綠色，不受FD230顯著影響。

腸炎沙門氏菌——無色，可能顯示輕微的生長沉淀，不受FD230顯著影響。

福氏志賀氏菌——無色，若培養(yǎng)基含F(xiàn)D230，則生長受抑。

參考文獻(xiàn)

1.March S. B and Ratnam S., 1986, J. Clin. Microbiol., 23:869-872.

2.Thompson J. S., Hodge D. S., Borczyk A. A., 1990, J. Clin. Microbiol.28, 2165-2168