貨號 | 名稱 | 規(guī)格 | 存儲 |
MV1575A | HiCrome™ EC O157:H7 Selective Agar Base,Modified（需添加劑FD187） | 100G,500G | 2-8℃密閉 |
FD187 | HiCrome EC O157:H7 Selective Supplement | 5VL | 2-8℃ |
原理
腸出血性大腸桿菌又名為產(chǎn)Vero細(xì)胞毒素的大腸桿菌（VTEC/EHEC）。盡管有許多血清型大腸桿菌產(chǎn)Vero細(xì)胞毒素（3），但大腸桿菌O157:H7是導(dǎo)致人類感染的常見的一種。它有幾種不常見的生化特性可用于鑒定。它屬于僅少數(shù)的beta葡萄糖醛酸酶（-）,24小時內(nèi)不發(fā)酵山梨醇或鼠李糖。它們可從接種到含山梨醇而非乳糖的培養(yǎng)基的糞便標(biāo)本中分離出來。
該款顯色培養(yǎng)基采用植物源蛋白胨，以取代動物源，避免了BSE/TSE風(fēng)險。它基于 Rappaport 和Henigh（1）描述的配方而成。培養(yǎng)基含山梨醇和顯色混合劑，不含乳糖和指示劑染料。顯色劑被大腸桿菌O157：H7 特異性裂解，產(chǎn)生深紫至洋紅色。普通大腸桿菌形成藍(lán)綠色菌落。
培養(yǎng)基中的HiVeg的水解物和酵母粉提供碳源、氮源營養(yǎng)和長鏈氨基酸、維生素和其他生長營養(yǎng)。氯化鈉維持滲透壓平衡。添加劑使培養(yǎng)基更具有選擇性（2）。添加劑中的亞碲酸鉀選擇性抑制氣單胞菌和普羅威登菌。添加劑中的新生霉素抑制革蘭陽性菌。月桂基硫酸鈉抑制伴隨的革蘭陽性菌群。
培養(yǎng)基成分
組成 G/L
HiVeg的水解物 5.000
酵母粉 3.000
山梨醇 7.000
合成離子活性劑1號 1.500
月桂基硫酸鈉 0.100
顯色混合劑 0.250
瓊脂 15.000
終pH（25°C） 6.8±0.2
配制
31.85g溶于990ml蒸餾水，加熱至沸使*溶解。高壓滅菌后，冷卻至45-50℃，無菌加入復(fù)溶的添加劑（貨號FD187，先用10ml蒸餾水復(fù)溶）?；靹虿A注平板。
質(zhì)量控制
外觀：奶油色至黃色均一自由粉末
成膠性: 牢固，與1.5%瓊脂相當(dāng)
制備好的培養(yǎng)基顏色和透明度：在平皿中為淺琥珀色，透明至輕微不透明凝膠
配比反應(yīng)：25°C下3.18% w/v水溶液，pH值為6.8±0.2
pH值要求：6.60-7.00
培養(yǎng)反應(yīng)：
加入添加劑（貨號FD187）后，在35-37°C培養(yǎng)18-24小時，觀察如下：
菌種 | 接種量（CFU） | 生長狀況 | 回收率 | 菌落顏色 |
大腸桿菌ATCC 25922 | 50-100 | 生長很少 | ≤10% | 藍(lán)綠色 |
大腸桿菌O157:H7 NCTC 12900 | 50-100 | 旺盛 | ≥50% | 深紫-洋紅色 |
肺炎克雷伯菌 ATCC 13883 | 50-100 | 一般-好 | 30-40% | 無色-淡紫色（黏液狀） |
銅綠假單胞菌 ATCC 27853 | 50-100 | 一般-好 | 30-40% | 無色 |
金黃色葡萄球菌 ATCC 25923 | ≥103 | 抑制 | 0% |
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枯草芽孢桿菌 ATCC 6633 | ≥103 | 抑制 | 0% |
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參考文獻(xiàn)
1.Rappaport F.and Henigh E.,1952,J.Clin.Pathol.,5:361.
2.Zadik P.M.,Cahpman P.A.and Siddons C. A.,1993,J.Med.Microbiol.,39,155-158.
3.Smith and Scottland,1988,J.Med.Microbiol.,26:77-85
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