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            蒂科（上海）生物科技有限公司
            
			  
			  
            
				
				
			  
            

            




 
 
						
            
			
            
				
			
            
		
            
		
            
			
            
				
            
					
            
						
            冷凍細(xì)胞活化步驟
            
						
            
							時間：2022-1-19閱讀：1302
						
            
						
            
							 
            1.冷凍細(xì)胞的活化原則為快速解凍，避免冰晶重新結(jié)晶對細(xì)胞造成傷害，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。

            2.細(xì)胞活化后，約需數(shù)日，或繼代一至二代，其細(xì)胞生長或特性表現(xiàn)才會恢復(fù)正常(例如產(chǎn)
            生單株抗體或是其它蛋白質(zhì))。2y2Q O6\#o&h4@+z,~
            3.材料37℃ 恒溫水，新鮮培養(yǎng)基，無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶，液氮或干冰容
            4.步驟：
            4.1操作人員應(yīng)戴防護(hù)面罩及手套，防止冷凍管可能爆裂之傷害。
            4.2自液氮或干冰容器中取出冷凍管，檢查蓋子是否旋緊，由于熱脹冷縮過程，此時蓋子易
            松掉。
            4.3將新鮮培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫，回溫后噴以70%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。
            4.4取出冷凍管，立即放入37°C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化以70%ethanol擦拭保存管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。
            4.5取出0.9ml解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入有培養(yǎng)基之培養(yǎng)容器內(nèi)(稀釋比例1:10～1:15)混合均勻，放入CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。另取0.1ml解凍細(xì)胞懸浮液作存活測試。
            4.6解凍后是否立即去除冷凍保護(hù)劑(例如DMSO或glycerol)，依細(xì)胞種類而異，一般而言大都不需要立即去除冷凍保護(hù)劑。惟若要立即去除，則將解凍之細(xì)胞懸浮液加入含有5-10ml培養(yǎng)基之離心管內(nèi)，離心1,000rpm,5分鐘，移去上清液，加入新鮮培養(yǎng)基，混合均勻，放入CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
            4.7若不需立即去除冷凍保存劑，則在解凍培養(yǎng)后隔日更換培養(yǎng)基。

            
							
						
            
					
            
				
            
			
            
		
            
		
	        




 
    
    		
    

		
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    

    

     
     
     
	 






	

            
	
            
		
            
			
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