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            上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司

            ?biosb BSB-3771-3說明書

            時間:2022-4-6閱讀:807

             

            biosb BSB-3771-3說明書

             

            TintoFast Ki-67 (RM360), RMab

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            TintoFast Ki-67 Antibody Immunohistochemistry on a Frozen Acetone-fixed Squamous Cell Carcinoma Tissue

             

             

            可能的使用 用于莫氏體外診斷
             
            總結(jié)與說明

            Ki-67 蛋白是增殖的細(xì)胞標(biāo)志物。它與細(xì)胞增殖密切相關(guān)。在間期,Ki-67 抗原只能在細(xì)胞核內(nèi)檢測到,而在有絲分裂中,大部分蛋白質(zhì)被重新定位到染色體表面。Ki-67 蛋白存在于細(xì)胞周期的所有活動階段(G1、S、G2 和有絲分裂),但在靜息細(xì)胞 (G0) 中不存在。

            TintoFast Ki-67 抗體是確定給定細(xì)胞群生長分?jǐn)?shù)的標(biāo)記。Ki-67 陽性腫瘤細(xì)胞的比例(Ki-67 標(biāo)記指數(shù))通常與癌癥的臨床病程相關(guān)。在這方面研究得好的例子是前列腺癌和乳腺癌。

              抗體類型 兔單克隆 克隆 RM360
              同型 IgG 反應(yīng)性 石蠟,冷凍
              本土化 控制 睪丸,扁桃體,骨髓,胎盤,結(jié)腸,。扁桃體、輸卵管、星形細(xì)胞瘤、乳腺癌、結(jié)腸癌
             
            介紹 TintoFast Ki-67 是一種兔單克隆抗體,來源于細(xì)胞培養(yǎng)上清液,經(jīng)過濃縮、透析、過濾滅菌和稀釋在 pH 7.5 的緩沖液中,含有 BSA 和疊氮化納作為防腐劑。
             
            可用性
            目錄號 抗體類型 稀釋 數(shù)量/數(shù)量
            BSB-3771-3 TintoFast 預(yù)稀釋 可以使用 3.0 毫升
            BSB-3771-7 TintoFast 預(yù)稀釋 可以使用 7.0 毫升
            BSB-3771-15 TintoFast 預(yù)稀釋 可以使用 15.0 毫升
                   
                   
               

            Mohs IHC 程序

            莫氏冷凍組織的標(biāo)本制備

            1. 將標(biāo)本嵌入 OCT 中的低溫恒溫器內(nèi)。

            2. 在 4-5 µm 處切割切片并安裝在帶正電的載玻片上,例如 Bio SB Hydrophilic Plus 載玻片 (BSB 7028) 或 TintoDetector 蓋間隙載玻片 (BSB 7006) 的下三分之一處。

            3. 在室溫下風(fēng)干載玻片 2 分鐘,然后在培養(yǎng)箱或干浴中在 60°C 下孵育載玻片 3 分鐘。

            4. 在室溫下用丙酮固定 2 分鐘,然后讓載玻片風(fēng)干。

            莫氏冷凍組織的預(yù)處理

            1. 將 TintoDetector 培養(yǎng)箱預(yù)熱至 110 °C。

            2. 將 TintoDetector Cap Gap 載玻片 (BSB 7006) 面對面放置,然后將它們插入 TintoDetector 載玻片支架 (BSB 7003)。

            3. 將載玻片浸入含 EDTA 的 ImmunoDNA Retriever 中,通過毛細(xì)作用提取足夠的溶液以覆蓋組織。

            4. 在預(yù)熱的 TintoDetector 培養(yǎng)箱中加熱載玻片 3 分鐘。

            5. 將載玻片轉(zhuǎn)移至室溫并冷卻 1 分鐘。

            莫氏 IHC 檢測

            1. HIER 后,將載玻片轉(zhuǎn)移到 ImmunoDNA 清洗機(jī),靜置 1-2 分鐘。

            2. 對于手動染色,在環(huán)境溫度下進(jìn)行抗體孵育。對于自動染色方法,請根據(jù)儀器制造商的說明進(jìn)行抗體孵育。

            3. 用 ImmunoDNA 洗滌器或去離子水清洗載玻片。

            4. 繼續(xù) IHC 檢測協(xié)議。用 ImmunoDNA 洗滌液在每個步驟之間清洗載玻片。

            HRP Green 免疫組化方案的縮寫 Mohs PolyDetector Plus DAB HRP Brown

            1. 與一抗孵育 5 分鐘

            2. 用緩沖液(TBST 或 PBST)清洗

            3. 用 M/R 鏈接孵育 4 分鐘

            4. 用緩沖液(TBST 或 PBST)清洗

            5. HRP 標(biāo)簽 4 分鐘。

            6. 用緩沖液(TBST 或 PBST)清洗

            7. 準(zhǔn)備

              • DAB Brown(在 1ml DAB 緩沖液中加入 1 滴 DAB Chromogen;充分混合)

              • 或 HRP Green(在 1 ml HRP Green Buffer 中加入 1 滴 HRP Green Chromogen;充分混合)

            8. 用 DAB 或 HRP Green 孵育 1-2 分鐘

            9. 用緩沖液(TBST 或 PBST)清洗

            10. 用蘇木精或核固紅復(fù)染 30 秒

            11. 用緩沖液(TBST 或 PBST)清洗

            12. 使用 AquaMounter 安裝或使用 Fast ChromoProtector 使組織脫水,然后使用 PermaMounter 安裝

            Mohs PolyDetector HRP Green 或 DAB 20 分鐘協(xié)議
            希爾 3 分鐘。
            一抗 5分鐘。
            第一步檢測 4分鐘。
            第二步檢測 4分鐘。
            底物色原 1-2 分鐘。
            復(fù)染/蓋玻片 變化

            此協(xié)議也可用于使用檸檬酸鹽或 EDTA 檢索的 FFPE 組織。

             

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