實(shí)驗(yàn)二 測定物質(zhì)含量 （苯酚）

目的：

檢測:苯酚含量   維生素C（吸收峰920nm）

原理：

 根據(jù)A=εbc，首先作苯酚的紫外吸收光譜，確定λmax，在λmax下作出苯酚水溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線，并在相同條件下測得試樣溶液的吸光光度值，確定試樣中苯酚的含量。

實(shí)驗(yàn)方法：

采用紫外可見近紅外分光光度計(jì)中濃度掃描方式，按照圖表配置標(biāo)準(zhǔn)苯酚，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

1．苯的紫外光譜

將1滴苯放入石英比色皿底部，蓋上蓋子，以空氣為參比，在λ為230nm~270nm范圍內(nèi)掃描，作出苯的紫外光譜，掃描速度為100nm/min。

2．苯酚紫外吸收光譜圖的繪制

取5.00mL苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液（100mg/L）于25mL容量瓶中，加水定容，用1cm比色皿，以純水作參比，在λ為225nm~300nm范圍內(nèi)掃描，繪制吸收曲線，確定λmax。

 3．標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

    用1cm比色皿，以純水為參比，在確定的實(shí)驗(yàn)條件下，按濃度由低至高順序依此測量標(biāo)準(zhǔn)系列的吸光度，作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

取5個(gè)25mL容量瓶，分別加入1.25、2.50、3.75、5.00、7.50mL苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液（100mg/L），加水定容，在選定的λmax下，測吸光度，作出標(biāo)準(zhǔn)曲線。

 4．試樣的測定

在與標(biāo)準(zhǔn)曲線制作相同條件下，測定試樣溶液的吸光度，取10mL試液于25mL容量瓶中，加水定容，測其吸光度。