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            現(xiàn)貨人乳酸脫氫酶ELISA 檢測試劑盒的準備

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              rar
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              2013年04月15日
            關鍵詞
            人乳酸脫氫酶ELISA 檢測試劑盒
            上傳者
            上海銳聰科技
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            資料簡介

            人乳酸脫氫酶ELISA 檢測試劑盒用 途:
                人LDH ELISA試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、緩沖液中細胞上清液及各種體液中的LDH 。本試劑盒可以檢測天然和重組的LDH 。本試劑盒于科研、而非用于臨床診斷。
                
            試驗原理:
                人LDH 試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知LDH 濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將LDH 和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中LDH 的濃度呈比例關系。

            自備材料
            蒸餾水。
            加樣器:5ul、10 ul、50 ul、100 ul、200、500 u、1000lul。
            振蕩器及磁力攪拌器等。

            安全性
            避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
            實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
            不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。


            操作注意事項
            試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
            實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
            不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
            使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
            使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
            洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
            底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
            加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
            按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

                 人乳酸脫氫酶ELISA 檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法
            血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
            血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
            細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
            保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

            試劑的準備
            標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。

            洗滌緩沖液(20×)的稀釋:蒸餾水20倍稀釋。

            操作步驟
            使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
            根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
            加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
            甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
            每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
            甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
            每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
            取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
            在450nm波長處測定各孔的OD值。


            結果分析
            以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的LDH 標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的LDH 含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

            局限
            6號標準品以上的結果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到的結果。

            試劑盒性能
            靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。
            特異性:不與人其它細胞因子反應。
            重復性:板內、板間變異系數(shù)均小于10%。

                 人乳酸脫氫酶ELISA 檢測試劑盒DA2355-0.1ml MCP-1/CCL2 (monocyte chemotactic protein1)mouse, rat 單核細胞趨化蛋白1抗體(大、小鼠) 0.1ml
            DA2355-0.2ml MCP-1/CCL2 (monocyte chemotactic protein1)mouse, rat 單核細胞趨化蛋白1抗體(大、小鼠) 0.2ml
            DA2356-0.2ml MCP-1/CCL2(Monocyte chemotactic protein 1)human 單核細胞趨化蛋白1抗體(人) 0.2ml
            DA2357-0.2ml MCP-2/CCL8(Monocyte chemotactic protein 2)human 單核細胞趨化蛋白2抗體(人) 0.2ml
            DA2358-0.2ml MCP-2/CCL8(Monocyte chemotactic protein 2)rat,mouse 單核細胞趨化蛋白2抗體(大、小鼠) 0.2ml
            DA2359-0.2ml MCP-3/CCL7(Monocyte chemotactic protein 3)human 單核細胞趨化蛋白3抗體(人) 0.2ml
            DA2360-0.2ml MCP-3/CCL7(Monocyte chemotactic protein 3)(rat,mouse) 單核細胞趨化蛋白3抗體(大、小鼠) 0.2ml
            DA2361-0.2ml CCL9/CCL10/MIP-1 gamma(Macrophage inflammatory protein 1-γ) 巨噬細胞炎癥蛋白-1γ抗體 0.2ml
            DA2362-0.2ml MC-1R (melanocortin-1-receptor) 黑皮質素-1受體抗體 0.2ml
            DA2363-0.2ml MCT1(monocarboxylate transporter 1) 單羧酸轉運蛋白-1抗體 0.2ml
            DAR1158-0.1ml Rabbit anti-mouse IgM/APC  熒光素APC標記兔抗小鼠IgM 0.1ml
            DAR1159-0.1ml Rabbit anti-horse IgG/APC 熒光素APC標記兔抗馬IgG 0.1ml
            DA2364-0.2ml MCM2(minichromosome maintenance protein 2) 微小染色體維持缺陷蛋白2抗體 0.2ml
            DA2365-0.2ml MCM3(minichromosome maintenance deficient 3) 微小染色體維持缺陷蛋白3抗體 0.2ml
            DA2366-0.2ml MCM7(minichromosome maintenance protein 7) 微小染色體維持缺陷蛋白7抗體 0.2ml
            DA2367-0.1ml M-CSF (Macrophage Colony Stimulating Factors) 巨噬細胞克隆刺激因子抗體 0.1ml
            DA2367-0.2ml M-CSF (Macrophage Colony Stimulating Factors) 巨噬細胞克隆刺激因子抗體 0.2ml
            DA2368-0.2ml Mcl-1(myeloid cell leukemia 1) 髓樣細胞白血病-1抗體 0.2ml
            DA2369-0.1ml MDM2 (urine double minute 2) 雙微體2癌基因抗體 0.1ml
            DA2369-0.2ml MDM2 (urine double minute 2) 雙微體2癌基因抗體 0.2ml
            DAR1161-0.1ml Streptavidin/APC 熒光素APC標記鏈霉親和素 0.1ml
            DAR1162-0.1ml rec Protein A/APC 熒光素APC標記重組純化蛋白A 0.1ml
            DA2370-0.1ml MDR1(multidrug resistance 1) 多藥耐藥蛋白抗體 0.1ml
            DA2370-0.2ml MDR1(multidrug resistance 1) 多藥耐藥蛋白抗體 0.2ml
            DA2371-0.2ml MEF2(myocyte enhancer-binding factor 2) 肌細胞增強因子2抗體 0.2ml
            DA2374-0.2ml Melamine 三聚氰胺抗體 0.2ml
            DA2375-0.2ml Melan-A/MART-1 黑色素瘤相關抗原/黑色素-A抗體 0.2ml
            DA2377-0.2ml MEK1/MAPKK1/MEKK1(mitogen activated protein kinase kinase 1) MEK1/MAPKK1抗體(N-端) 0.2ml
            DA2378-0.2ml Menin/Men1 Menin抑癌蛋白抗體 0.2ml
                人乳酸脫氫酶ELISA 檢測試劑盒DA2379-0.2ml Metal ion transporter 擬南介金屬離子轉運蛋白抗體 0.2ml
            DA2380-0.2ml Mfn1 (Mitofusin1) 線粒體融合蛋白1抗體 0.2ml
            DAR1164-0.1ml Mouse IgG/APC 熒光素APC標記小鼠IgG(細胞流式同型對照) 0.1ml
            DAR1165-0.1ml Goat IgG/APC 熒光素APC標記羊IgG(細胞流式同型對照) 0.1ml
            DAR1166-0.1ml Rat IgG/APC 熒光素APC標記大鼠IgG(細胞流式同型對照) 0.1ml
            DAR1167-0.1ml Bovine IgG/APC 熒光素APC標記牛IgG 0.1ml
            DAR1168-0.1ml Bovine IgM/APC 熒光素APC標記牛IgM 0.1ml
            DA2381-0.1ml MGMT (O6-methylguanine-DNA methyltransferase) O6甲基鳥嘌呤DNA甲基轉移酶抗體 0.1ml
            DA2381-0.2ml MGMT (O6-methylguanine-DNA methyltransferase) O6甲基鳥嘌呤DNA甲基轉移酶抗體 0.2ml
            DA2382-0.2ml MT(metallothionein) 金屬硫蛋白抗體 0.2ml
            DA2383-0.2ml MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)(NT) 層粘連蛋白受體1抗體(N端) 0.2ml
            DA2384-0.2ml MTA1(Metastasis-associated 1) 腫瘤轉移相關蛋白1抗體 0.2ml
            DA2385-0.2ml MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)(CT) 層粘連蛋白受體1抗體(C端) 0.2ml
            DA2386-0.2ml Myf6(Myogenic factor 6) 生肌調節(jié)因子6抗體 0.2ml
            DAR1175-0.1ml Guinea IgM/APC 熒光素APC標記豚鼠IgM 0.1ml
            DAR1176-0.1ml Horse IgG/APC 熒光素APC標記馬IgG 0.1ml
            DAR1177-0.1ml Horse IgM/APC 熒光素APC標記馬IgM 0.1ml
            DAR1178-0.1ml human IgG/APC 熒光素APC標記人IgG 0.1ml
            DAR1179-0.1ml human IgM/APC 熒光素APC標記人IgM 0.1ml
            DA2387-0.2ml MICA(MHC class I polypeptide-related sequence A) 細胞應激分子抗體 0.2ml
            DA2388-0.2ml Microsporidia 蜜蜂微孢子蟲蛋白抗體 0.2ml
            DA2389-0.2ml Midnolin isoform Protein 1 中腦核仁蛋白1抗體 0.2ml
            DA2390-0.2ml Midnolin isoform Protein 2 中腦核仁蛋白2抗體 0.2ml
            DA2391-0.2ml MK(Midkine) 中期因子/肝素結合生長因子抗體 0.2ml
            DA2392-0.2ml MLCK(myosin light chain kinase) 肌球蛋白輕鏈激酶抗體 0.2ml
            DA2393-0.1ml MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor) 巨噬細胞移動抑制因子抗體 0.1ml
            DA2393-0.2ml MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor) 巨噬細胞移動抑制因子抗體 0.2ml
            DA2394-0.1ml MIP-1α (macrophage inflammatory protein 1α) 巨噬細胞炎癥因子1α抗體 0.1ml
            DA2394-0.2ml MIP-1α (macrophage inflammatory protein 1α) 巨噬細胞炎癥因子1α抗體 0.2ml
            DA2421-0.2ml Mouse IgA 抗小鼠IgA抗體 0.2ml
            DA2431-0.2ml α-MSH/POMC(alpha-melanocyte stimulating hormone) α黑素細胞刺激素/阿黑皮素原抗體 0.2ml
            DA2395-0.1ml MIP-1β (macrophage inflammatory protein 1β) 巨噬細胞炎癥因子1β 抗體 0.1ml
            DA2395-0.2ml MIP-1β (macrophage inflammatory protein 1β) 巨噬細胞炎癥因子1β 抗體 0.2ml
            DA2396-0.1ml MIP2 (myocardial ischemic preconditioning upregulated protein 2) 巨噬細胞炎癥蛋白2抗體 0.1ml

             

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