手機版
化工儀器網(wǎng)手機版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關注視頻號
真核表達系統(tǒng)的出現(xiàn)客服了傳統(tǒng)原核表達系統(tǒng)諸多缺陷
原核表達系統(tǒng)是一個成熟的系統(tǒng)，常用于研究基因功能。由于原核表達系統(tǒng)存在包涵體蛋白純化困難、蛋白修飾不*等缺陷，人們開始利用真核表達系統(tǒng)來研究基因。
在各種表達系統(tǒng)中，首先采用原核表達系統(tǒng)進行研究，這也是目前成熟的表達系統(tǒng)。該技術的主要方法是將已克隆到目的基因DNA的片段的載體(通常為質(zhì)粒)轉(zhuǎn)化到細菌(通常為大腸桿菌)中，通過IPTG誘導和終純化獲得所需的目的蛋白。其優(yōu)點是可以在短時間內(nèi)獲得基因表達產(chǎn)物，所需成本相對較低。
但與此同時，原核表達系統(tǒng)仍有許多不可克服的缺點：如常用的表達系統(tǒng)不能調(diào)節(jié)表達時間和表達水平，某些基因的連續(xù)表達可能對宿主細胞造成毒性作用，過度表達可能導致非生理反應，靶蛋白往往以包涵體的形式表達，導致產(chǎn)物純化困難；而且，原核表達系統(tǒng)的翻譯后修飾系統(tǒng)并不完善，表達產(chǎn)物的生物活性較低。為了克服上述缺點，許多學者將原核基因調(diào)控系統(tǒng)引入真核基因調(diào)控領域。它的優(yōu)點是：
1.根據(jù)原核生物蛋白與靶基因相互作用的高度特異性設計，靶基因與真核基因調(diào)控序列基本沒有同源性，因此不存在基因的非特異性激活或抑制
2.能誘導高效基因表達，高達105倍，超越其他系統(tǒng)；
3.它可以嚴格控制基因表達，即既可以控制基因表達的“開關”，又可以人為控制基因表達量
因此，利用真核表達系統(tǒng)表達目的蛋白越來越受到重視。目前，基因工程研究中常用的真核表達系統(tǒng)包括酵母表達系統(tǒng)、昆蟲細胞表達系統(tǒng)和哺乳動物細胞表達系統(tǒng)。
1.根本的區(qū)別是，原核表達系統(tǒng)的表達系統(tǒng)是原核細胞；真核表達系統(tǒng)在真核細胞如酵母細胞、昆蟲細胞和哺乳動物細胞中表達。
2.兩種表達系統(tǒng)都通過含有原核或真核啟動子和其他表達相關元件的質(zhì)粒系統(tǒng)表達外源基因。
3.與真核表達系統(tǒng)相比，原核表達系統(tǒng)的表達效率易于優(yōu)化和調(diào)整，表達量高。然而，當用于表達真核外源基因時，由于不同的蛋白質(zhì)折疊和糖鏈修飾，其應用受到限制。真核表達系統(tǒng)的表達量相對較低。雖然酵母和昆蟲系統(tǒng)的表達量相對較高，但哺乳動物基因的表達也存在不足。
相關產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權或有權使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權使用作品的，應在授權范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關法律責任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關權利。
采購中心