C32細(xì)胞,C32細(xì)胞株污染的排除
產(chǎn)品名稱(chēng):C32細(xì)胞
貨號(hào):C32
規(guī)格:1~3*106細(xì)胞/25cm2培養(yǎng)瓶
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污染的排除:培養(yǎng)的細(xì)胞一旦污染應(yīng)及時(shí)處理,防止污染其他細(xì)胞。通常選高壓滅菌被污染的細(xì)胞,然后棄掉。如果有價(jià)值的細(xì)胞被污染,并且污染程度較輕,可以通過(guò)及時(shí)排除污染物,挽救細(xì)胞恢復(fù)正常。常用的排除微生物污染的方法有以下幾種:
1、抗生素排除法:抗生素是細(xì)胞培養(yǎng)中殺滅細(xì)菌的主要手段。各種抗生素性質(zhì)不同,對(duì)微生物作用也不同,聯(lián)合應(yīng)用比單用效果好,預(yù)防性應(yīng)用比污染后應(yīng) 用好;如果發(fā)生微生物污染后再使用抗生素,常難以*。有的抗生素對(duì)細(xì)菌僅有抑制作用,無(wú)殺滅效應(yīng)。反復(fù)使用抗生素還能使微生物產(chǎn)生耐藥性,而且對(duì)細(xì)胞本身也有一定影響,因此有人主張盡量不用抗生素處理,當(dāng)然,一些有價(jià)值的細(xì)胞被污染后,仍需要用抗生素挽救,在這種情況下,可采用5-10倍于常用量的沖擊 法,加入高濃度抗生素后作用24-48小時(shí),再換入常規(guī)的培養(yǎng)液,有時(shí)可以奏效。
2、加溫除菌:根據(jù)支原體耐熱性能差的特點(diǎn)。有人將受支原體污染的細(xì)胞置于41度中作用5-10小時(shí)(zui長(zhǎng)可以達(dá)18小時(shí))殺滅支原體。但是41度對(duì)細(xì)胞本身應(yīng)有較大影響,故在處理前,應(yīng)先進(jìn)行預(yù)試驗(yàn),確定zui大限度殺傷支原體而對(duì)細(xì)胞影響較小的處理時(shí)間。
3、動(dòng)物體內(nèi)接種:受微生物污染的腫瘤細(xì)胞可以接種到同種動(dòng)物皮下或腹腔,借動(dòng)物體內(nèi)免疫系統(tǒng)消滅掉微生物,腫瘤細(xì)胞卻能在體內(nèi)生長(zhǎng),待一定時(shí)間,從體內(nèi)取出再進(jìn)行培養(yǎng)繁殖。
4、與巨噬細(xì)胞共培養(yǎng):在良好的體外培養(yǎng)條件下巨噬細(xì)胞可以存活7-10天,并可以分泌一些細(xì)胞因子支持其他細(xì)胞的科隆生長(zhǎng)。與體內(nèi)情況相似,巨噬 細(xì)胞在體外條件下仍然可以吞噬微生物并將其消化。利用96孔板將極少培養(yǎng)細(xì)胞與巨噬細(xì)胞共培養(yǎng),可以在高度稀釋培養(yǎng)細(xì)胞、極大地降低微生物污染程度地同 時(shí),更有效地發(fā)揮巨噬細(xì)胞清除污染地效能。本方法與抗生素聯(lián)合應(yīng)用效果更佳。
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