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            上海達(dá)為科生物科技有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第6年

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            結(jié)直腸癌類器官原代培養(yǎng)總結(jié)會(huì)

            時(shí)間:2024-5-23閱讀:590
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            2024年58日,周,公司組織,由實(shí)驗(yàn)室主管劉博主導(dǎo),實(shí)驗(yàn)室全體成員參與,對(duì)結(jié)直腸癌類器官原代培養(yǎng)相關(guān)知識(shí)點(diǎn),進(jìn)行了培訓(xùn)與交流。本次會(huì)議,主要針對(duì)結(jié)直腸癌類器官原代培養(yǎng),就以下內(nèi)容展開了交流

            1.組織4℃條件下從醫(yī)院取回。

            2.消毒取樣的15ml管,取出組織,放到10ml大皿中。

            3.用含4抗的PBS溶液浸泡,清洗組織。

            4.再用組織緩沖液浸泡、清洗三遍。

            5.將組織剪成1mm3大小的組織塊,轉(zhuǎn)移到15ml管中消化。

            6.在37℃水浴鍋中,消化15min。

            7.取少量液體在顯微鏡下觀察,看到較多的單細(xì)胞和較少的細(xì)胞簇后,終止消化。

            8.用100μm篩過濾,然后300g4℃離心5min,移去上清。

            9.重懸沉淀,轉(zhuǎn)移到2ml離心管中,300g4℃離心5min,移去上清。

            10.估算沉淀的細(xì)胞量,以1:25的比例添加基質(zhì)膠,重懸。

            11.24孔板鋪板,冰上操作,每孔點(diǎn)膠25ul。

            12.鋪板后,放到37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中15min成膠。

            13.然后每孔添加600ul 結(jié)直腸癌類器官培養(yǎng)基,放到37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中。

             

            本次會(huì)議,提升公司對(duì)結(jié)直腸癌類器官原代培養(yǎng)的重要知識(shí)點(diǎn)的認(rèn)知


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