在反相色譜分離多肽和蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)中，使用 (TFA) 作為離子對(duì)試劑是常見(jiàn)的手段，流動(dòng)相中的通過(guò)與疏水鍵合相和殘留的極性表面以多種模式相互作 用，來(lái)改善峰形、克服峰展寬和拖尾問(wèn)題。同時(shí)反相色譜 與電噴霧質(zhì)譜聯(lián)用已成為多肽和蛋白質(zhì)的分子量測(cè)定和結(jié) 構(gòu)分析的重要工具，但是含有的流動(dòng)相對(duì)質(zhì)譜離 子的產(chǎn)生具有抑制作用，一定程度上降低了液質(zhì)聯(lián)用技術(shù) 的靈敏性和分析可靠性。 目前常用的方法是降低流動(dòng)相中 TFA 濃度， 達(dá)到降低這種 抑制作用，但是也會(huì)造成色譜分析質(zhì)量的降低；而如果用 甲酸代替 TFA, 會(huì)造成色譜分離柱效降低，達(dá)不到理想的分 離效果。
本文采用雙三元液相色譜系統(tǒng) (DGLC)，充分利用雙泵的優(yōu) 勢(shì)，將兩個(gè)泵分別作為流動(dòng)相的輸液泵和柱后溶液的傳輸 泵，實(shí)現(xiàn)與質(zhì)譜的全自動(dòng)連接。采用 TFA-Fix 技術(shù)或者抑制 器技術(shù)降低流動(dòng)相中 TFA 對(duì) MS 的離子產(chǎn)生的抑制作用， 尤其是柱后抑制器技術(shù)大大提高了多肽樣品在質(zhì)譜上的靈 敏度。 測(cè)試條件一 儀器：Ultimate DGP 3600 系列，包括帶有在線脫氣單元的雙 三元梯度泵 DGP-3600RS、自動(dòng)進(jìn)樣器 WPS-3000TRS、柱溫 箱 TCC-3000RS、檢測(cè)器 DAD-3000RS 和 MS TSQ Vantage。
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賽默飛色譜及質(zhì)譜 | 下載次數(shù) |
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