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制備色譜和分析色譜到底有啥關(guān)系？看完這篇文章想必你就明白了
分析色譜是制備色譜的基礎(chǔ)。當(dāng)我們?cè)诜治錾V上取得了良好的分離效果時(shí)，可以將其放大，應(yīng)用到制備色譜上，由此，我們需要考慮調(diào)整上樣量，流速，梯度：
1.上樣量的調(diào)整：
他與分析色譜柱和制備色譜柱的柱長(zhǎng)和柱內(nèi)徑有關(guān)：
具體關(guān)系時(shí)；制備柱上樣量/分析柱上樣量=制備柱長(zhǎng)/分析柱長(zhǎng)*制備柱內(nèi)徑的平方/分析柱內(nèi)徑的平方；
2.流速的調(diào)整：
制備柱流速/分析柱流速=制備柱體積/分析柱體積=制備柱長(zhǎng)/分析柱長(zhǎng)*制備柱內(nèi)徑的平方/分析柱內(nèi)徑的平方；
3.梯度的調(diào)整：
制備柱梯度/分析柱梯度=制備柱體積/分析柱體積*制備柱流速/分析柱流速；
制備色譜與分析色譜有啥關(guān)系？
很多初接觸色譜領(lǐng)域的朋友對(duì)制備色譜這個(gè)名詞比較陌生。其實(shí)，在化學(xué)化工醫(yī)藥等廣泛采用的層析法以及薄層色譜就是典型的制備色譜，換句話說(shuō)，將分析色譜的進(jìn)樣量增大，同時(shí)得出大量的所需物質(zhì)（餾分）的過(guò)程就可以稱為制備色譜。分析色譜的目的，是分析出混合物中一個(gè)（或者幾個(gè)）純物質(zhì)的含量。制備色譜的目的，是從混合物中得到純物質(zhì)。而制備色譜系統(tǒng)則是利用制備色譜的思想高效能得到純化物質(zhì)的多個(gè)分析測(cè)試設(shè)備聯(lián)用的總稱。
制備色譜能當(dāng)分析色譜用嗎？
目前，很多客戶的要求都傾向于買(mǎi)一臺(tái)液相能同時(shí)解決制備和分析的所有問(wèn)題，那就相當(dāng)OK。這樣的客戶大多是科研經(jīng)費(fèi)緊張，好不容易批下來(lái)點(diǎn)錢(qián)，不想都花在后期純化和分析上，所以二合一。
在我看來(lái)，分析液相和制備液相是通用的，只是精度的差別問(wèn)題。比如，分析的液相一般流速在0.1～10mL/min，活塞的一個(gè)沖程大概是10μL，而普通的制備液相一般都是10～100mL的流速，因此活塞桿的尺寸也會(huì)變大，一個(gè)沖程差不多是100μL；流速的精度相對(duì)來(lái)說(shuō)就差了很多。流速大了，管路也相應(yīng)的粗了不少，以降低高流速帶來(lái)的背景壓力；但這樣的儀器用于分析的話，柱后的擴(kuò)散現(xiàn)象相當(dāng)?shù)膮柡?，即使在色譜柱上達(dá)到基線分離的兩個(gè)峰，由于柱后擴(kuò)散的作用，到達(dá)檢測(cè)器的時(shí)候，差不多又會(huì)合到一起了；另外就是檢測(cè)器的差異，主要是檢測(cè)池的大小和狹縫的大小不同帶來(lái)的靈敏度的不同。制備儀器一般靈敏度是分析的1/20，以保證大量進(jìn)樣后，不會(huì)超過(guò)量程太多而平頭，分不清到底分沒(méi)分開(kāi)了。
倒是有個(gè)折中的辦法，就是買(mǎi)分析型的液相，然后接個(gè)半制備的色譜柱。半制備就是直徑一厘米的柱子，流速5mL以內(nèi)，因此這個(gè)分析液相能達(dá)到；進(jìn)樣量大約是分析柱的10～20倍，檢測(cè)器可能會(huì)平頭，沒(méi)關(guān)系，換個(gè)波長(zhǎng)，找個(gè)吸收較弱的波長(zhǎng)當(dāng)檢測(cè)波長(zhǎng)就OK了，不是大量制備的話，我想基本可以滿足需要了。