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賽默飛 PCR 擴(kuò)增儀詳解
賽默飛世爾科技(Thermo Fisher Scientific)的 PCR 擴(kuò)增儀系列是廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、基因組學(xué)和臨床研究領(lǐng)域的實驗室設(shè)備。其產(chǎn)品涵蓋多種型號,從基礎(chǔ)研究到高通量實驗均有適用選擇。以下內(nèi)容將詳細(xì)介紹賽默飛 PCR 擴(kuò)增儀的工作原理、主要產(chǎn)品及其貨號、技術(shù)特點以及應(yīng)用領(lǐng)域。
一、PCR 擴(kuò)增儀的工作原理
PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))是一種用于擴(kuò)增特定 DNA 片段的分子生物學(xué)技術(shù)。擴(kuò)增儀通過溫度循環(huán)實現(xiàn) DNA 變性、退火和延伸,從而在短時間內(nèi)獲得大量目標(biāo) DNA 片段。
PCR 三個關(guān)鍵步驟:
變性(Denaturation):將雙鏈 DNA 加熱至 94–98°C,使其解鏈為單鏈。
退火(Annealing):將溫度降低至 50–65°C,使引物與單鏈 DNA 配對。
延伸(Extension):將溫度升至 72°C,DNA 聚合酶利用脫氧核苷三磷酸(dNTPs)合成新鏈。
循環(huán)上述步驟 20-40 次后,可擴(kuò)增出大量目標(biāo) DNA。
二、主要產(chǎn)品及貨號
1. Thermo Scientific™ Veriti™ PCR 擴(kuò)增儀
貨號:4375786
主要特點:
6 個溫控模塊,可實現(xiàn)梯度設(shè)置,支持不同實驗條件優(yōu)化。
溫度范圍:4–99.9°C,升降溫速率達(dá) 3.9°C/秒。
可編程觸摸屏,直觀易操作。
應(yīng)用場景:
基因擴(kuò)增實驗、PCR 條件優(yōu)化、小規(guī)?;蚍中头治?。
2. Thermo Scientific™ ProFlex™ PCR 擴(kuò)增儀
貨號:4484073
主要特點:
支持 3 個獨立溫控模塊,每個模塊可設(shè)置不同梯度。
提供快速模式和標(biāo)準(zhǔn)模式,適應(yīng)不同實驗需求。
最大升溫速率 6.0°C/秒。
應(yīng)用場景:
中高通量實驗室的多樣化 PCR 實驗。
3. Thermo Scientific™ SimpliAmp™ PCR 擴(kuò)增儀
貨號:A24811
主要特點:
緊湊型設(shè)計,適合日常實驗室使用。
高性能溫控系統(tǒng),溫度精度可達(dá) ±0.25°C。
用戶友好的彩色觸摸屏,便于程序編輯。
應(yīng)用場景:
小規(guī)?;驍U(kuò)增實驗、教學(xué)實驗。
4. Thermo Scientific™ QuantStudio™ 系列實時熒光定量 PCR 儀
貨號:
QuantStudio™ 3:A28136
QuantStudio™ 5:A28139
主要特點:
實時監(jiān)測 PCR 擴(kuò)增過程,精確檢測樣品中的核酸含量。
支持多重檢測和高通量分析。
提供多種反應(yīng)板選項,如 96 孔和 384 孔。
應(yīng)用場景:
基因表達(dá)分析、基因分型、拷貝數(shù)變異檢測。
5. Thermo Scientific™ Applied Biosystems™ MiniAmp™ PCR 擴(kuò)增儀
貨號:A37834
主要特點:
小型便攜設(shè)計,適合場地受限的實驗室。
可通過藍(lán)牙連接移動設(shè)備,方便數(shù)據(jù)傳輸和程序編輯。
溫控精度高,支持快速和標(biāo)準(zhǔn) PCR 模式。
應(yīng)用場景:
教學(xué)實驗、外出采樣后的樣品分析。
三、技術(shù)特點
1. 精確溫控
賽默飛 PCR 擴(kuò)增儀普遍采用先進(jìn)的 Peltier 溫控模塊,確保溫度穩(wěn)定性和均勻性,溫度精度可達(dá) ±0.1°C。
梯度功能允許用戶優(yōu)化 PCR 條件,提高實驗成功率。
2. 多通量選擇
從單模塊到多模塊設(shè)計,支持 96 孔、384 孔以及微量反應(yīng)管的靈活選擇,滿足從低通量到高通量實驗需求。
3. 操作簡便
所有型號均配備彩色觸摸屏,支持程序快速編輯和運(yùn)行狀態(tài)實時監(jiān)控。
某些型號(如 MiniAmp™)支持藍(lán)牙和 Wi-Fi 連接,便于遠(yuǎn)程控制和數(shù)據(jù)管理。
4. 節(jié)能與環(huán)保
大多數(shù)型號具有自動待機(jī)功能,有效降低能耗和熱量產(chǎn)生,符合實驗室綠色環(huán)保需求。
四、應(yīng)用領(lǐng)域
基礎(chǔ)研究
基因克隆、基因突變和核酸定量分析等分子生物學(xué)基礎(chǔ)實驗。
醫(yī)學(xué)診斷
病原體檢測(如病毒和細(xì)菌 DNA/RNA 的擴(kuò)增與檢測)。
癌癥相關(guān)基因表達(dá)分析。
農(nóng)業(yè)與食品檢測
轉(zhuǎn)基因作物鑒定。
食品安全檢測中的致病微生物篩查。
環(huán)境監(jiān)測
水體和土壤中的微生物 DNA 分析。
環(huán)境樣本中基因污染物檢測。
教學(xué)與培訓(xùn)
高校和科研機(jī)構(gòu)的實驗教學(xué)工具,幫助學(xué)生學(xué)習(xí) PCR 技術(shù)原理及其應(yīng)用。
五、使用注意事項
實驗條件優(yōu)化
初次實驗應(yīng)通過梯度功能優(yōu)化退火溫度,確保引物與模板 DNA 高效結(jié)合。
注意擴(kuò)增反應(yīng)體系中 MgCl? 濃度的調(diào)整。
設(shè)備維護(hù)
定期清潔儀器表面和反應(yīng)模塊,避免樣品污染。
更新軟件版本,確保功能和性能的最新狀態(tài)。
安全操作
在設(shè)備運(yùn)行期間避免打開蓋子,以免意外中斷溫度循環(huán)。
確保設(shè)備周圍通風(fēng)良好,避免過熱。
樣品與耗材
使用賽默飛推薦的 PCR 反應(yīng)耗材(如 96 孔板和反應(yīng)管),確保最佳兼容性和擴(kuò)增效果。
樣品體積應(yīng)符合設(shè)備的推薦范圍,避免反應(yīng)液溢出。
六、總結(jié)
賽默飛 PCR 擴(kuò)增儀憑借豐富的產(chǎn)品線性能,滿足了從基礎(chǔ)研究到應(yīng)用的多樣化需求。用戶可根據(jù)實驗規(guī)模、預(yù)算和功能需求選擇最合適的型號,如 Veriti™ 系列適合條件優(yōu)化,QuantStudio™ 系列則適合實時定量分析。通過良好的操作習(xí)慣和定期維護(hù),賽默飛 PCR 擴(kuò)增儀能夠為實驗室提供可靠、高效的基因擴(kuò)增支持,助力科學(xué)研究和技術(shù)應(yīng)用的不斷進(jìn)步。