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賽默飛Thermo LightCycler® 480 II 實時熒光定量PCR儀介紹
賽默飛（Thermo Fisher Scientific）的LightCycler® 480 II實時熒光定量PCR儀是一款高性能、多功能的PCR檢測儀器，專為基因表達研究、基因分型、拷貝數(shù)變異分析、突變檢測等實驗需求而設(shè)計。作為分子生物學(xué)研究中廣泛應(yīng)用的儀器之一，LightCycler® 480 II以其高通量、高靈敏度、強大的多重檢測能力以及快速熱循環(huán)技術(shù)，在科研、臨床和工業(yè)檢測領(lǐng)域表現(xiàn)出色。
一、儀器概述
LightCycler® 480 II實時熒光定量PCR儀結(jié)合了先進的光學(xué)檢測系統(tǒng)與快速溫控技術(shù)，是一款為高精確度核酸定量分析而設(shè)計的設(shè)備。該儀器支持96孔和384孔反應(yīng)板，能夠適應(yīng)不同規(guī)模的實驗需求，同時以其出色的熒光檢測能力和數(shù)據(jù)分析功能，為分子生物學(xué)研究提供了可靠的技術(shù)平臺。
這款設(shè)備可以實時監(jiān)測PCR擴增過程中熒光信號的變化，幫助研究人員動態(tài)、定量分析目標(biāo)基因的表達或突變狀態(tài)。無論是基礎(chǔ)研究還是臨床診斷，LightCycler® 480 II都能夠為科學(xué)家提供高效、穩(wěn)定和可靠的數(shù)據(jù)支持。
二、技術(shù)特點
1. 高性能光學(xué)檢測系統(tǒng)
LightCycler® 480 II配備高靈敏度光學(xué)模塊，支持多通道熒光檢測，可對多個目標(biāo)基因進行同時監(jiān)測。
高靈敏度檢測：適合低豐度基因的分析，可靈敏檢測低拷貝數(shù)樣本。
多通道支持：支持多達5種熒光染料的同時檢測，適合多重PCR實驗。
熒光染料兼容性：支持SYBR Green、TaqMan探針、EvaGreen以及其他常見熒光標(biāo)記物。
2. 快速熱循環(huán)技術(shù)
LightCycler® 480 II采用高效熱循環(huán)模塊，能夠快速升溫和降溫，大幅度縮短PCR實驗時間，提高檢測效率。
快速反應(yīng)速度：每次實驗的反應(yīng)時間顯著縮短，同時保持較高的擴增效率。
精確溫控系統(tǒng)：溫控精度達到±0.1°C，確保PCR擴增的高穩(wěn)定性和重復(fù)性。
3. 多通量配置
該儀器支持兩種孔板配置，滿足不同實驗室規(guī)模需求：
96孔板：適合中等規(guī)模實驗和科研使用。
384孔板：為高通量實驗設(shè)計，支持大規(guī)模篩查和復(fù)雜檢測。
4. 智能數(shù)據(jù)分析
LightCycler® 480 II配備功能全面的數(shù)據(jù)分析軟件，能夠滿足用戶的多樣化數(shù)據(jù)處理需求。
Ct值分析：快速、準(zhǔn)確地識別循環(huán)閾值（Ct值），提供可靠的擴增曲線。
熔解曲線分析：用于擴增反應(yīng)的特異性驗證，幫助識別非特異性產(chǎn)物或污染。
絕對與相對定量：支持基于標(biāo)準(zhǔn)曲線的絕對定量以及2^-ΔΔCt法的相對定量分析。
突變檢測和基因分型：支持高分辨率熔解曲線（HRM）分析，用于基因突變檢測和基因分型研究。
5. 靈活性與兼容性
LightCycler® 480 II儀器設(shè)計靈活，適應(yīng)多種實驗類型和需求：
多種反應(yīng)模式：支持標(biāo)準(zhǔn)PCR、實時定量PCR、多重PCR、熔解曲線分析等。
兼容不同實驗條件：支持多種熒光標(biāo)記體系和反應(yīng)方案。
自動化擴展：可與實驗室自動化設(shè)備集成，進一步提高實驗效率。
三、核心功能
1. 基因表達分析
LightCycler® 480 II能夠?qū)崟r監(jiān)控基因表達水平的變化，適用于各種基因表達研究場景。
相對定量：對樣本間基因表達水平差異進行分析。
絕對定量：通過標(biāo)準(zhǔn)曲線直接計算基因拷貝數(shù)。
2. 突變檢測
該儀器可以靈敏檢測低頻率突變，適用于點突變、插入/缺失突變等多種基因突變類型的研究。
HRM分析：高分辨率熔解曲線技術(shù)能夠高效區(qū)分樣本中的突變和野生型序列。
單核苷酸多態(tài)性（SNP）檢測：快速準(zhǔn)確識別樣本中的特定基因變異。
3. 基因分型
LightCycler® 480 II支持基因分型實驗，通過分析熒光信號，對樣本進行遺傳多態(tài)性分型。
4. 拷貝數(shù)變異（CNV）分析
通過定量PCR實驗，該儀器能夠檢測基因組中目標(biāo)基因的拷貝數(shù)變化，幫助研究拷貝數(shù)擴增或缺失的基因。
5. 病毒載量檢測
LightCycler® 480 II被廣泛應(yīng)用于病毒載量分析，通過定量檢測病毒核酸，監(jiān)測感染狀況和治療效果。
四、技術(shù)參數(shù)
以下為LightCycler® 480 II的主要技術(shù)參數(shù)：
| 參數(shù) | 描述 |
|---|---|
| 樣品通量 | 96孔板、384孔板 |
| 光學(xué)檢測通道 | 5通道熒光檢測 |
| 溫控精度 | ±0.1°C |
| 熱循環(huán)速度 | 快速升溫和降溫 |
| 支持的熒光染料 | SYBR Green、TaqMan、EvaGreen等 |
| 數(shù)據(jù)分析功能 | Ct值分析、熔解曲線分析、基因表達定量 |
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 基因表達、突變檢測、病毒載量分析等 |
五、儀器優(yōu)勢
1. 高靈敏度與高通量
LightCycler® 480 II具檢測靈敏度和高通量能力，可同時處理大批量樣本，顯著提高實驗效率。
2. 多功能性
該儀器支持多種實驗類型，包括基因表達分析、基因分型、突變檢測和拷貝數(shù)分析等，覆蓋了絕大多數(shù)PCR應(yīng)用場景。
3. 操作簡便
儀器的設(shè)計注重用戶體驗，配套軟件界面直觀，實驗設(shè)置和數(shù)據(jù)分析簡便易用。
4. 實驗結(jié)果可靠
高精度的溫控系統(tǒng)和靈敏的光學(xué)模塊確保了實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。
5. 靈活的擴展能力
兼容多種耗材和反應(yīng)方案，支持與自動化工作站集成，適應(yīng)不同實驗室的需求。
六、應(yīng)用領(lǐng)域
LightCycler® 480 II在多個領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用：
1. 基礎(chǔ)研究
基因表達調(diào)控研究
基因功能研究
遺傳多樣性分析
2. 醫(yī)學(xué)研究
腫瘤標(biāo)志物檢測
遺傳疾病相關(guān)基因分析
病毒載量檢測和病原體定量
3. 藥物開發(fā)
藥物基因組學(xué)研究
個體化醫(yī)療相關(guān)基因研究
藥物代謝相關(guān)基因分型
4. 工業(yè)檢測
食品安全檢測中的病原體分析
環(huán)境樣本中的微生物檢測
七、總結(jié)
賽默飛LightCycler® 480 II實時熒光定量PCR儀憑借其高靈敏度、多通道檢測、快速熱循環(huán)技術(shù)和強大的數(shù)據(jù)分析能力，成為分子生物學(xué)和基因組學(xué)研究中的重要工具。它不僅能夠滿足基礎(chǔ)科研需求，還在臨床和工業(yè)檢測領(lǐng)域發(fā)揮了重要作用。
無論是小規(guī)模實驗還是大規(guī)模高通量篩查，LightCycler® 480 II都能夠為用戶提供可靠的結(jié)果和高效的實驗體驗，為基因研究和診斷提供全面的技術(shù)支持。
