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            上海雅吉生物科技有限公司

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            C666-1鼻咽癌細胞培養(yǎng)説明

            閱讀:356      發(fā)布時間:2024-6-3
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            C666-1鼻咽癌細胞收到后處理

            細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)霓k法。收到細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內,嚴格無菌操作,培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的培養(yǎng)液收集至離心管中,加入6ml培養(yǎng)基,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);超過80%匯合度時,根據(jù)情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松,傳代后建議一瓶用原瓶里面的培養(yǎng)基,另外一瓶用自己配的培養(yǎng)基

            C666-1鼻咽癌細胞培養(yǎng)步驟

            一、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

            二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

            a)、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

            1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

            2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

            3.輕輕吹打細胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

            4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

            b)、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

            方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

            方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

            PS:若客戶收到2ml小管細胞,收到細胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內,嚴格無菌操作;將小管細胞轉移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進行傳代(方法同上)。

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            三、細胞凍存:(注:無血清凍存液凍存細胞的方法請參考我司貨號:C7001)

            1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;

            2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;

            3、用適量的凍存液重懸細胞,并放置于凍存管中;

            4、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃

            C666-1鼻咽癌細胞部分相關細胞如下:

            人膽囊上皮細胞永生化

            人胰腺癌相關成纖維細胞永生化

            人胰腺癌細胞永生化

            人膽囊上皮細胞永生化+GFP

            C57小鼠巨噬細胞永生化

            人乳腺腺癌細胞+luc

            豬扁桃體上皮細胞永生化

            人風濕性關節(jié)滑膜成纖維細胞永生化

            人腸癌細胞永生化

            豬脂肪干細胞永生化

            鴨胚肝間質細胞永生化

            羊睪丸間質細胞永生化

            兔肝間質細胞永生化

            人頸靜脈球瘤細胞永生化

            人主動脈內皮細胞永生化

            山羊乳腺上皮細胞永生化

            豬骨骼肌衛(wèi)星細胞永生化

            人乳腺上皮細胞+RFP

            人肝竇內皮細胞永生化

            人副神經(jīng)節(jié)瘤細胞永生化

            人腦星形膠質母細胞瘤+RFP

            人臍靜脈內皮細胞永生化+GFP

            人腸息肉上皮細胞永生化

            人膽囊癌細胞+luc

            人膽囊癌細胞+luc

            人胰腺癌細胞吉西他濱耐藥株

            人原代聽神經(jīng)瘤細胞永生化

            人原代髓核細胞永生化

            人原代神經(jīng)鞘膜瘤細胞永生化

            人胰腺腫瘤成纖維細胞永生化

            人子宮內膜上皮細胞永生化

            大鼠腦微血管內皮細胞永生化

            小鼠肺成纖維細胞永生化

            小鼠肝癌細胞+luc

            小鼠骨肉瘤成骨細胞+luc 

            小鼠胰腺星狀細胞永生化

            鴨腦微血管內皮細胞永生化

            湖羊瘤胃上皮細胞永生化

             更多細胞請咨詢我們:C666-1鼻咽癌細胞


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