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            上海雅吉生物科技有限公司

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            鈣檢測(cè)試劑盒(鄰甲酚酞絡(luò)合酮比色法)培養(yǎng)説明

            閱讀:823      發(fā)布時(shí)間:2024-4-1
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            鈣檢測(cè)試劑盒(鄰甲酚酞絡(luò)合酮比色法)

             

             

            產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

            (Calcium)是一種金屬元素,常溫下呈銀白色晶體,動(dòng)物的骨骼、蛤殼、蛋殼都含有碳酸鈣,檢測(cè)生命體鈣含量,主要通過(guò)檢測(cè)鈣離子濃度實(shí)現(xiàn)的,用分光度法檢測(cè)鈣較為常見(jiàn)該法需要合適的金屬指示劑或選擇性結(jié)合鈣離子后引起變色的染料化合物目前較為常用的染料有鄰-甲酚酞絡(luò)合酮(OCPC)、偶氮砷Ⅲ、甲基麝香草酚藍(lán)(MTB)等。

            雅吉生物鈣檢測(cè)試劑盒(鄰甲酚酞絡(luò)合酮比色法)是利用溶液中鈣離子在堿性條件下能與OCPC結(jié)合,生成紫紅色的絡(luò)合物,加入鎂離子螯合劑,去除鎂離子背景干擾,通過(guò)分光光度計(jì)檢測(cè)575nm處吸光度,根據(jù)公式計(jì)算出總鈣含量。

            該法的優(yōu)點(diǎn):

            1、是國(guó)際上推薦的血清鈣的常規(guī)檢測(cè)方法;

            2、試劑單一,操作簡(jiǎn)便;

            3、靈敏度高;

            4、顯色穩(wěn)定;

            5、使用樣本量小。

            該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。

             

            產(chǎn)品組成:

            名稱(chēng)

            50T

            Storage

            試劑(A):標(biāo)準(zhǔn)(2.5mmol/L)

            1ml

            4℃避光

            試劑(B):Ca Assay Buffer

            50ml

            RT避光

            試劑(C):OCPC顯色液

            50ml

            4℃避光

            試劑(D):ddH2O

            10ml

            RT

             

            自備材料:

            1、離心管或試管

            2、比色杯、分光光度計(jì)

             

             

            操作步驟(僅供參考)

            1、制備樣品︰

            ①血漿、血清樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,可以直接用于該試劑盒的測(cè)定,-20°℃凍存,用于Ca的檢測(cè)。

            ②細(xì)胞或組織樣品︰取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行勻漿,低速離心取上清,-20℃凍存,用于Ca的檢測(cè)。

            ③高濃度樣品︰如果樣品中含有較高濃度的Ca,可以使用ddHzO稀釋?zhuān)灰耸褂闷胀ㄕ麴s水稀釋。

            2、配制Ca顯色工作液︰臨用前,取Ca Assay Buffer和OCPC顯色液等量混合,即為Ca顯色工作液,即配即用;4℃避光保存,不宜久置。

            3、Ca加樣︰選用經(jīng)稀鹽酸處理及去離子水清潔的干燥試管或者一次性無(wú)菌聚乙烯離心管,

            按照下表設(shè)置空白管、標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的鈣離子含量過(guò)高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定,樣品的檢測(cè)最好能設(shè)置平行管。

            加入物(μl

            空白管

            標(biāo)準(zhǔn)管

            測(cè)定

            ddH2O

            0.025

            -

            -

            標(biāo)準(zhǔn)(2.5mmol/L)

            -

            0.025

            -

            待測(cè)樣本

            -

            -

            0.025

            Ca顯色工作液

            2.0

            2.0

            2.0

             

            4、Ca測(cè)定:混勻,室溫靜置10min ,以空白管調(diào)零,比色杯光徑1cm ,分光光度計(jì)575nm處檢測(cè),讀取標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管的吸光度(即為A標(biāo)準(zhǔn),A測(cè)定)。

             

            計(jì)算:

            血清、血漿中鈣(mmol/L)=(A測(cè)定/A標(biāo)準(zhǔn))×2.5

            組織中鈣(mmol/mg)=(A測(cè)定/A標(biāo)準(zhǔn))×2.5×V/待測(cè)樣品質(zhì)量(mg)

            式中:

            A測(cè)定=測(cè)定管的吸光度

            A標(biāo)準(zhǔn)=標(biāo)準(zhǔn)管的吸光度

            V=組織提取液的總體積(L)

             

            參考區(qū)間

            健康成年人血清鈣濃度︰2.1~2.6mmol/L

            兒童血清鈣濃度:2.25~2.67mmol/L

             

            性能指標(biāo):

            線性范圍:1.25~5.0mmol/L

            回收率:98%~101.5%

            批內(nèi)CV: 1.08%~1.60%

            批間CV∶3.05%~4.12%

             

            注意事項(xiàng)∶

            1、溶血樣本對(duì)檢測(cè)有干擾,盡量避免采用溶血樣本。

            2、OCPC顯色液偶爾會(huì)結(jié)晶析出,配制成的顯色工作液有時(shí)會(huì)析出,可取上清液使用。

            3、該試劑盒對(duì)鈣離子敏感度較高,測(cè)定器皿一定要干凈,最好使用一次性聚乙烯塑料器皿。

            4、可用血清或肝素抗凝血漿樣本,不宜采用鈣螯合劑及草酸鹽做抗凝劑的樣本。5、膽紅素可產(chǎn)生負(fù)干擾,含有較高膽紅素的樣本可用血清對(duì)照消除該干擾。

            6、本法能夠用于自動(dòng)生化分析儀終點(diǎn)檢測(cè)法。

            7、在該試劑盒條件下建議待測(cè)樣品中鈣離子濃度應(yīng)大于0.5mmolL為宜,否則有可能造成檢測(cè)誤差。

            8、如果樣品濃度過(guò)高,應(yīng)用蒸餾水稀釋后重測(cè),結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。

            有效期∶6個(gè)月有效﹔常溫運(yùn)輸,4℃保存。


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