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PCR板的選擇

閱讀：1139 發(fā)布時(shí)間：2023-8-31

PCR板是一種在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)中主要作為參與擴(kuò)增反應(yīng)的引物、Taq DNA聚合酶、dNTP、模板核酸、Mg、緩沖液等的承載物。其本身材質(zhì)在當(dāng)今主要以聚丙烯（PP）為主，能更好適應(yīng)PCR反應(yīng)過程中反復(fù)高低溫設(shè)定，并且能夠?qū)崿F(xiàn)高溫高壓滅菌操作。為配合排槍、PCR儀等實(shí)現(xiàn)高通量操作，較常使用的為96孔或384孔的PCR板。板型符合SBS國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，且為適應(yīng)不同廠家的PCR儀，根據(jù)裙邊設(shè)計(jì)又可分為無裙邊、半裙邊、升裙邊和全裙邊四種設(shè)計(jì)模式。

qPCR的核心數(shù)據(jù)是Ct值，而熒光信號(hào)是Ct值計(jì)算的數(shù)據(jù)來源，所以管內(nèi)的熒光能否完好地傳遞至檢測(cè)器是至關(guān)重要的。白色的管壁能夠阻止熒光穿過管壁和折射，進(jìn)而防止熒光傳至加熱模塊，也就是放管子的金屬孔壁，透明管會(huì)導(dǎo)致熒光被模塊吸收或發(fā)生不一致反射等情況。因此相比于透明管，使用白管能較為有效地避免信號(hào)干擾，從而采集到更強(qiáng)、更聚焦的熒光信號(hào)。

PCR板的裙邊指的是板周圍的延伸部分。常見的有無裙邊、半裙邊和全裙邊三種。無裙邊能夠通配所有機(jī)型，而全裙邊PCR板通常用在自動(dòng)化工作站中。裙邊作用是在構(gòu)建反應(yīng)體系時(shí)為移液過程提供穩(wěn)定性支撐，以及在結(jié)合自動(dòng)化工作站時(shí)提供機(jī)械強(qiáng)度和抓手。

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