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            細胞凋亡檢測試劑盒 | MedChemExpress (MCE)

            閱讀:104      發(fā)布時間:2024-9-10
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            細胞凋亡檢測試劑盒 (Hoechst法)

            MCE 國際站:Cell Apoptosis Analysis Kit (Hoechst staining)

            品牌:MedChemExpress (MCE)

            存儲條件:4oC 保存 6 個月或 -20oC 保存一年避光保存

            簡介:MCE 細胞凋亡檢測試劑盒 (Hoechst 法) 采用 Hoechst 33258 染色的方法快速檢測細胞凋亡。

            概述:MCE 細胞凋亡檢測試劑盒 (Hoechst 法) 采用 Hoechst 33258 染色的方法快速檢測細胞凋亡。Hoechst 33258 是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料。細胞凋亡時,細胞膜通透性增強,染色質(zhì)發(fā)生固縮,且凋亡細胞膜上的 p-糖蛋白泵功能受損而不能及時將 Hoechst 33258 排出細胞,故凋亡細胞經(jīng) Hoechst 33258 染色后熒光強度比正常細胞明顯增強。使用熒光顯微鏡檢測時,正常細胞為弱藍色熒光,凋亡細胞為強藍色熒光。本試劑盒常用于貼壁細胞、懸浮細胞及組織切片的細胞凋亡檢測,染色快速方便,最快僅需 25 分鐘即可完成。

            描述:

            MCE 細胞凋亡分析試劑盒(Hoechst 染色)提供了一種快速、方便的檢測細胞凋亡的方法。Hoechst 33258 是一種藍色熒光染料(與 dsDNA 結(jié)合時激發(fā)/發(fā)射最大值 ≈ 352/461 nm),它使凋亡細胞中濃縮的染色質(zhì)比正常細胞中的染色質(zhì)更亮。它在凋亡細胞中顯示強藍色熒光,但在正常細胞中僅顯示微弱熒光。



            操作說明:貼壁細胞1. 取一潔凈蓋玻片,用 70% 乙醇浸泡 5 min,無菌超凈臺中吹干備用。注:也可將蓋玻片用無菌 PBS 或 0.9% NaCl 洗滌三次,再用細胞培養(yǎng)液洗滌一次后備用。2. 將蓋玻片置于六孔板,接種細胞,培養(yǎng)至細胞密度約 50-80%3.刺激細胞發(fā)生凋亡。棄去培養(yǎng)液,加入0.5mL Fixative Solution,室溫固定10 min 以上。注:4℃ 固定過夜效果更佳。4.棄去 Fixative Solution,加入PBS 或 0.9% NaCI洗滌兩次,每次3min。5.加入0.5 mL Hoechst 33258 Stain,染色5min。6.棄去染色液,用 PBS 或0.9% NaCI洗滌兩次,每次3min。7.在載玻片上加一滴Antifade Mounting Medium,小心蓋上貼有細胞的蓋玻片。注意避免產(chǎn)生氣泡。8. 熒光顯微鏡下檢測熒光強度。注:Hoechst 33258 和雙鏈 DNA 結(jié)合后,最大激發(fā)波長為 352 nm,最大發(fā)射波長為 461 nm。懸浮細胞1.4°℃,1000 g 離心 3-5 min,收集10-10細胞。2.加入0.5 mL Fixative Solution,室溫固定10 min 以上。注:4°℃ 固定過夜效果更佳。3.4℃, 1000 g 離心 3-5 min,棄去Fixative Solution,加入PBS 或0.9% NaCl洗滌兩次,每次3min。4.加入約 50μL PBS或0.9% NaCI輕輕重懸細胞沉淀,并滴加至載玻片上。5.室溫下晾干至細胞不會輕易隨液體流動。6.加0.5 mL Hoechst33258 Stain,染色5min。7.棄去染色液,用 PBS 或0.9%NaCI洗滌兩次,每次3min。8.在載玻片上加一滴Antifade Mounting Medium,小心蓋上蓋玻片。注意避免產(chǎn)生氣泡。9.熒光顯微鏡下檢測熒光強度。注:Hoechst 33258和雙鏈DNA結(jié)合后,最大激發(fā)波長為352 nm,最大發(fā)射波長為461 nm。組織切片1.常規(guī)包埋切片后,將切片處理至可用于免疫組化染色。2.加入 PBS 或 0.9% NaCI洗滌兩次,每次3min。3.加入0.5 mL Hoechst 33258 Stain,染色5min。4.棄去染色液,用PBS 或0.9% NaCl洗滌兩次,每次3min。5.小心將切片置于載玻片上,加一滴Antifade Mounting Medium,小心蓋上蓋玻片。注意避免產(chǎn)生氣泡。6.熒光顯微鏡下檢測熒光強度。注:Hoechst 33258 和雙鏈DNA 結(jié)合后,最大激發(fā)波長為352 nm,最大發(fā)射波長為461 nm。

            注意事項:1. 熒光染料存在淬滅的問題,染色后應(yīng)盡快檢測熒光強度。2. Hoechst 33258 對光敏感,整個實驗過程盡量避光下進行。3. Hoechst 33258 對人體有害,操作時務(wù)必小心。4. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品。5. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

            銷售產(chǎn)品:Heterophyllin B  | VU0155069  | Chicoric acid  | Psoralen  | GSK429286A  | Sitagliptin (phosphate)  | N3-PEG4-C2-NH2  | L-Cysteine (hydrochloride)  | Teicoplanin  | ISRIB

            Trending products:Recombinant Proteins  |  Bioactive Screening Libraries  |  Natural Products  |  Dye Reagents  |  PROTAC  |  Isotope-Labeled Compounds


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