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Oligo (dT)30 磁珠

MCE 國際站：Oligo (dT)₃₀ Magnetic Beads

品牌：MedChemExpress (MCE)

存儲條件：4°C，3 年禁止凍結(jié)

簡介：Oligo (dT)30 Magnetic Beads 具有較高的 Oligo (dT)30 載量，磁珠通過 Oligo (dT)30 與 mRNA 的 poly (A) 互補配對，經(jīng)磁性分離后可從真核總 RNA 或直接從動物/植物組織和細胞粗提物中快速分離結(jié)構(gòu)完整的高純度 mRNA。

概述：MCE Oligo (dT)30 Magnetic Beads 具有較高的 Oligo (dT)30 載量，磁珠通過 Oligo (dT)30 與 mRNA 的 poly (A) 互補配對，經(jīng)磁性分離后可從真核總 RNA 或直接從動物/植物組織和細胞粗提物中快速分離結(jié)構(gòu)完整的高純度mRNA，分離的 mRNA 可直接用于 RT-PCR、固相 cDNA 文庫構(gòu)建、S1 核酸酶分析、核糖核酸酶保護分析、引物延伸、斑點雜交、體外翻譯實驗、削減雜交、RACE、Northern 分析、基因克隆和基因表達分析等。

描述：

MCE Oligo (dT)₃₀ 磁珠專為從真核生物總 RNA 或直接從細胞、植物和動物組織的粗提取物中快速分離高純度的完整 mRNA 而設(shè)計。MCE Oligo (dT)₃₀ 磁珠的使用依賴于信使 RNA 的 poly A 尾與結(jié)合到磁珠表面的寡聚 dT 序列之間的堿基配對。分離的 mRNA 可直接用于分子生物學(xué)中的大多數(shù)下游應(yīng)用：RT-PCR、固相 cDNA 文庫構(gòu)建、S1 核酸酶分析、核糖核酸酶保護測定、引物延伸、點和槽雜交、體外翻譯實驗、RACE、消減雜交、北方分析、基因克隆和基因表達分析等。

操作說明：磁珠預(yù)處理將磁珠充分混懸，取 100 μL磁珠置于 1.5 mL EP 管 中，加入 1 mL Binding Buffer，重懸磁珠，磁性分離，棄上清，以上步驟重復(fù) 3-4 次。加入 1 mL 的 Binding Buffer，重懸磁珠，備用。從動物/植物組織或細胞提取 RNA (僅供參考)1. 樣品預(yù)處理1.1 動物/植物組織取適量組織，在液氮中充分研磨后轉(zhuǎn)移至新的 EP 管，每 20-50 mg動物組織或 100 mg 植物組織加入 1 mL Lysis/Binding Buffer，充分勻漿后室溫旋轉(zhuǎn)孵育 5 min。14,000 rpm 室溫離心 5 min，收集上清。上清可用于后續(xù) mRNA 純化，或置于 -80°C 保存?zhèn)溆?。注：裂解過程中可使用 1 mL 注射器針頭或槍頭多次吹吸剪切基因組 DNA，以降低溶液粘度。1.2 細胞懸液4,000 rpm 室溫離心 5 min，棄上清，保留細胞沉淀。每 1-4 × 106 個細胞加入 1 mL Lysis/Binding Buffer，用移液槍吹打數(shù)次確保細胞裂解。14,000 rpm 室溫離心 5 min，收集上清。上清可用于后續(xù) mRNA 純化，或置于 -80°C 保存?zhèn)溆谩Ｗⅲ毫呀膺^程中可使用 1 mL 注射器針頭或槍頭多次吹吸剪切基因組 DNA，以降低溶液粘度。2. 提取 mRNA2.1 將預(yù)處理的磁珠重懸后磁性分離，棄上清。2.2 將裂解液與磁珠渦旋混勻 3-5 min，磁性分離，棄上清。2.3 分別用 1 mL Washing Buffer A 和 1 mL Washing Buffer B 清洗磁珠，磁吸分離，棄上清。以上重復(fù) 3-4 次，去除可能的污染物。2.4 若磁珠-mRNA 復(fù)合物后續(xù)用于下游酶促反應(yīng) (如固相 cDNA 合成等)，加入 500 μL Washing Buffer B 洗滌 1 次，再加入相應(yīng)酶緩沖液洗滌 1 次，即可用于下游分析。2.5 若要從磁珠中洗脫 mRNA，加入 10-20 μL 10 mM Tris-HCl，75-80°C 孵育 2 min，經(jīng)磁性分離后將上清迅速轉(zhuǎn)移至新的 RNase-free EP 管中即可。從總 RNA 中純化 mRNA (僅供參考)以純化 200 μg 總 RNA 為例：1. 取 100 μL 含有 200 μg 總 RNA 的樣本與 100 μL Binding Buffer 充分混合。注：可用 DEPC 預(yù)處理的無菌水或 10 mM Tris-HCl (pH 7.5) 將總 RNA 稀釋至 200 μg/100 μL。2. 65°C 孵育 2 min，迅速置于冰上。3. 將上述 200 μL 反應(yīng)液與 100 μL 預(yù)處理的磁珠混勻，室溫旋轉(zhuǎn)孵育 5 min，磁性分離，棄上清。4. 取 1 mL Washing Buffer A 和 1 mL Washing Buffer B 清洗磁珠，磁吸分離，棄上清。以上重復(fù) 3-4 次，去除可能的污染物。5. 若磁珠-mRNA 復(fù)合物后續(xù)用于下游酶促反應(yīng) (如固相 cDNA 合成等)，加入 500 μL Washing Buffer B 洗滌 1 次，再加入相應(yīng)酶緩沖液洗滌 1 次，即可用于下游分析。6. 若要從磁珠中洗脫 mRNA，加入 10-20 μL 10 mM Tris-HCl，75-80°C 孵育 2 min，經(jīng)磁性分離后將上清迅速轉(zhuǎn)移至新的 RNase-free EP 管中即可。

注意事項：1. 本產(chǎn)品使用過程中需防止混入 RNase，推薦使用 MCE RNase Inhibitor (HY-K1033)。2. 建議 Oligo(dT)30-mRNA 復(fù)合物立即用于 RT-PCR 實驗。3. 本產(chǎn)品應(yīng)避免離心、干燥或凍存，禁止長時間置于磁場，否則可能會引起磁珠聚團。4. 所有用于 mRNA 提取的 Buffer 和耗材都應(yīng)該是 RNase-free。5. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。6 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

銷售產(chǎn)品：4-Hydroxylonchocarpin  | Harmalol (hydrochloride)  | Savolitinib  | Desthiobiotin-Iodoacetamide  | Laninamivir octanoate  | DiO  | Ceritinib  | DBCO-Cy3  | Darolutamide  | Tauroursodeoxycholate (sodium)

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