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支原體是目前為止發(fā)現(xiàn)的最小的原核生物，支原體污染一般在顯微鏡下不可見，很難察覺，但細(xì)胞會受到極大的損傷，主要通過以下途徑影響細(xì)胞生長及功能。那么細(xì)胞被支原體污染，該怎么辦呢？讓我們一起來看看吧！

一、支原體污染的來源

1. 環(huán)境污染：如細(xì)胞培養(yǎng)房、細(xì)胞培養(yǎng)箱、超凈工作臺內(nèi)已被支原體污染；

2. 實驗器材的污染：移液槍、移液管、細(xì)胞培養(yǎng)皿、水浴鍋等；

3. 細(xì)胞培養(yǎng)試劑的污染：培養(yǎng)基、胰酶、血清、細(xì)胞凍存液等；

二、處理方法

1. 及時更換培養(yǎng)液：可以減緩支原體的污染，但不能wan全清除；

2. 使用抗生素類去除試劑：抗生素對支原體有較好的抑制作用，可以有效清除支原體，但長時間使用抗生素，會產(chǎn)生耐藥性的風(fēng)險。在使用單一抗生素清除效果不佳時，可以考慮更換抗生素或者采用復(fù)合型抗生素試劑；

3. 使用非抗生素去除試劑：非抗生素清除試劑不會產(chǎn)生耐藥性，對支原體的清除效果可以達(dá)到100%，且?guī)缀鯇?xì)胞沒有影響，是去除支原體的shou選試劑。

4. 實驗室環(huán)境清潔：發(fā)生支原體污染后，應(yīng)及時處理已被污染的細(xì)胞，并對細(xì)胞房進行che底的清潔和消殺，防止交叉污染。

三、預(yù)防方法

1. 定期消毒：定期對細(xì)胞房、實驗服、移液槍、細(xì)胞培養(yǎng)箱等進行消毒，及時清除支原體；

2. 檢查細(xì)胞培養(yǎng)試劑：選擇來源可靠的試劑及耗材產(chǎn)品，在進行細(xì)胞培養(yǎng)操作之前，檢查細(xì)胞培養(yǎng)基、血清、胰酶等試劑，可選擇合適孔徑的濾膜進行過濾除菌，使用過程中如發(fā)現(xiàn)有污染應(yīng)及時更換；

3. 規(guī)范細(xì)胞培養(yǎng)操作：建立良好的細(xì)胞培養(yǎng)操作SOP，遵循無菌操作原則，規(guī)范穿戴實驗服、口罩、手套等，并在細(xì)胞培養(yǎng)開始時進行消毒；規(guī)范處理實驗廢棄物；

4. 在培養(yǎng)基中加入支原體預(yù)防試劑：

加入抑制支原體DNA合成的抗生素：例如氟喹諾酮類抗生素；

加入抑制支原體蛋白質(zhì)合成的抗生素：例如大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素、雙萜烯類等抗生素；

加入非抗生素類支原體清除試劑：如膜活性多肽，通過與支原體膜特異性結(jié)合che底清除支原體。

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