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            ELISA樣品制備和采集方法

            閱讀:897      發(fā)布時(shí)間:2023-7-28
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            不同的細(xì)胞或組織,具體的ELISA樣品制備和采集方法可能不同,具體的ELISA樣品制備和采集方法如下:

            血清:使用血清分離管(SST),讓樣品在室溫下凝結(jié)30分鐘,然后在1000 x g下離心15分鐘。立即取出血清并進(jìn)行測定或等分

            試樣,將樣品儲(chǔ)存在≤-20°C的溫度下。

            血漿:使用EDTA、肝素或檸檬酸鹽作為抗凝劑收集血漿。在收集后30分鐘內(nèi)以1000 x g離心15分鐘。立即測定或等分試樣,并

            將樣品儲(chǔ)存在≤-20°C的溫度下。

            貧血小板血漿:使用EDTA、肝素或檸檬酸鹽作為抗凝劑收集血漿。在收集后30分鐘內(nèi)以1000 x g離心15分鐘。建議在2-8°C下

            對血漿進(jìn)行額外的10000 x g離心10分鐘,以完quan去除血小板。立即測定或等分試樣,并將樣品儲(chǔ)存在≤-20°C的溫度下。

            細(xì)胞培養(yǎng)上清液:以500 x g離心5分鐘去除顆粒。立即取出上清液或等分試樣進(jìn)行分析,并將樣品儲(chǔ)存在≤-20°C的溫度下。

            組織勻漿:組織勻漿的制備會(huì)因組織類型而異。用1X PBS沖洗組織以去除多余的血液,在20 mL 1X PBS中勻漿,并在≤-20°C下

            儲(chǔ)存過夜。在進(jìn)行兩次凍融循環(huán)以破壞細(xì)胞膜后,將勻漿以5000xg離心5分鐘。立即取出上清液并進(jìn)行分析?;蛘撸瑢悠返确?/span>

            ,并在≤-20°C的溫度下儲(chǔ)存。

            細(xì)胞裂解物:將細(xì)胞溶解在裂解緩沖液中,并在冰上放置30分鐘。將試管以14000 x g離心5分鐘,以除去不溶性物質(zhì)。將上清

            液等分放入新的試管中,并丟棄剩余的全細(xì)胞提取物。使用總蛋白測定法定量總蛋白濃度。立即測定或等分試樣,并在≤-20°C

            下儲(chǔ)存。組織溶解物:用PBS沖洗組織,切成1-2毫米的片,并用PBS中的組織勻漿器勻漿。加入等體積的含有蛋白酶抑制劑的RIPA緩沖

            液,在室溫下輕輕攪拌裂解組織30分鐘。用離心機(jī)清除碎屑。使用總蛋白測定法定量總蛋白濃度。立即測定或等分試樣,并在

            ≤-20°C下儲(chǔ)存。

            唾液:在試管中收集唾液,并在10000 x g下離心5分鐘。收集水層,立即進(jìn)行測定或等分試樣,并將樣品儲(chǔ)存在≤-20°C的溫度

            下。

            尿液:無菌收集當(dāng)天的第一個(gè)尿液(中流),直接排泄到無菌容器中。用離心機(jī)去除顆粒物。立即測定或等分試樣,并在≤-20°C

            下儲(chǔ)存。

            母乳:在2-8°C下以1000 x g離心15分鐘。收集含水部分,并重復(fù)該過程總共3次。立即測定或等分試樣,并在≤-20°C下儲(chǔ)存。

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