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            PCR管實驗過程中的注意事項

            閱讀:2069      發(fā)布時間:2022-10-27
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              PCR管用聚丙烯(MDPP)配方改良而成,使得產(chǎn)品達到比同類產(chǎn)品更好的導熱率,快速的反應(yīng)和均一的熱導性。使用高精密小通量模具生產(chǎn)PCR耗材,確保塑料原料在模具中的散布均一性和同步性。從而使每一個PCR產(chǎn)品具有相似性和均一度。
             
              實驗證明:影響PCR反應(yīng)的關(guān)鍵因素中:PCR儀,酶,鎂離子,緩沖液,引物退火溫度等等,其中PCR耗材的質(zhì)量和PCR儀器溫度準確性與實驗結(jié)果密切相關(guān),PCR管和PCR板要求具友極薄的管壁和高度均一性。PCR管壁的厚薄會影響傳熱及傳熱速度。管體的顏色,均一性,透光度等都會直接影響到PCR,尤其是aPCR(定量PCR)的結(jié)果。
             
              PCR管實驗過程中的注意事項:
             
              1、戴一次性手套,若不小心濺上反應(yīng)液,立即更換手套。
             
              2、使用一次性吸頭,嚴禁與PCR產(chǎn)物分析室的吸頭混用,吸頭不要長時間暴露于空氣中,避免氣溶膠的污染。
             
              3、避免反應(yīng)液飛濺,打開反應(yīng)管時為避免此種情況,開蓋前稍離心收集液體于管底.若不小心濺到手套或桌。上,應(yīng)立刻更換手套并用稀酸擦拭桌面。
             
              4、進口pcr管操作多份樣品時,制備反應(yīng)混合液,先將dNTP、緩沖液、引物和酶混合好,然后分裝,這樣即可以減少操作,避免污染,又可以增加反應(yīng)的準確度。
             
              5、加入反應(yīng)模板,加入后蓋緊反應(yīng)管。
             
              6、操作時設(shè)立陰陽性對照和空白對照,即可驗證PCR反應(yīng)的可靠性,又可以協(xié)助判斷擴增系統(tǒng)的可信性。
             
              7、盡可能用可替換或可高壓處理的加樣器,由于加樣器容易受產(chǎn)物氣溶膠或標本DNA的污染,使用可替換或高壓處理的加樣器,如沒有這種特殊的加樣器,至少PCR操作過程中加樣器應(yīng)該專用,不能交叉使用,尤其是PCR產(chǎn)物分析所用加樣器不能拿到其它兩個區(qū)。
             
              8、重復實驗,驗證結(jié)果,慎下結(jié)論。

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