臨床醫(yī)學(xué)
何謂朗格爾漢斯島（胰島）
朗格爾漢斯島的細(xì)胞及其作用
朗格爾漢斯島的觀察
存在于胰臟的內(nèi)分泌腺稱為朗格爾漢斯島（胰島）。
胰腺包括向十二指腸分泌淀粉酶等消化酶的外分泌細(xì)胞和分泌激素的內(nèi)分泌細(xì)胞，其中絕大部分為外分泌細(xì)胞。內(nèi)分泌細(xì)胞作為小細(xì)胞團(tuán)像島那樣散布在外分泌細(xì)胞中，根據(jù)發(fā)現(xiàn)者德國病理學(xué)家保爾·朗格爾漢斯的姓名，被命名為朗格爾漢斯島。
由朗格爾漢斯島分泌的胰島素等激素具有調(diào)整血糖值的作用，若該功能下降將導(dǎo)致糖尿病。
胰臟分為胰頭、胰體、胰尾，朗格爾漢斯島多存在于胰尾。
朗格爾漢斯島包括α（A）細(xì)胞、β（B）細(xì)胞、δ（D）細(xì)胞，分別分泌不同激素，調(diào)整血液中所含的葡萄糖濃度。由此，可保持血糖值的正常狀態(tài)。
α細(xì)胞分泌名為胰高血糖素的激素。胰高血糖素具有提高偏低的血糖值的作用。血糖值下降時(shí)，胰高血糖素將促進(jìn)糖原的分解（糖原分解促進(jìn)作用），提高血液中的葡萄糖濃度。同時(shí)胰高血糖素促進(jìn)細(xì)胞中蓄積的葡萄糖向血液排出。由此，胰高血糖素通過提高葡萄糖濃度來提升血糖值。
β細(xì)胞分泌名為胰島素的激素。胰島素具有降低偏高的血糖值的作用。血糖值上升時(shí)，胰島素將促進(jìn)葡萄糖的合成（糖原合成促進(jìn)作用），降低血液中的葡萄糖濃度。通過胰島素合成的葡萄糖將轉(zhuǎn)換為糖原并作為能量蓄積，從而抑制葡萄糖向血液排出。同時(shí)胰島素還促進(jìn)細(xì)胞吸收葡萄糖。由此，胰島素通過降低葡萄糖濃度來降低血糖值。
δ細(xì)胞分泌名為生長抑素的激素。生長抑素通過攝取食物來分泌。除抑制胰高血糖素及胰島素分泌以外，還抑制從十二指腸分泌的膽囊收縮素及促胰液素等促進(jìn)胰液分泌的激素分泌。通過由生長抑素抑制此類胰液分泌，血糖值能夠保持正常狀態(tài)。另外還抑制消化系統(tǒng)的過度運(yùn)動(dòng)及營養(yǎng)吸收和消耗。
通過抗胰高血糖素抗體與抗胰島素抗體的熒光免疫染色，可將胰高血糖素陽性細(xì)胞作為α細(xì)胞，將胰島素陽性細(xì)胞作為β細(xì)胞進(jìn)行可視化，明確朗格爾漢斯島內(nèi)的各細(xì)胞分布。使用細(xì)胞計(jì)數(shù)應(yīng)用程序，還可定量評(píng)價(jià)各陽性細(xì)胞的面積或熒光強(qiáng)度。近年來，作為治療糖尿病的1種方法，對(duì)從iPS細(xì)胞等人類多功能干細(xì)胞制作胰臟細(xì)胞并進(jìn)行移植的研究取得進(jìn)展，且研究表明其中由糖尿病小鼠衍生而來的移植片所具有的胰島素陽性細(xì)胞面積率較高，在此評(píng)價(jià)過程中也使用了熒光免疫染色的定量方法。
進(jìn)行此類評(píng)價(jià)使用倍率約為4倍至20倍的物鏡，由于無法將切片整體納入視野，只能以存在朗格爾漢斯島的部位為中心進(jìn)行觀察及拍攝。但近年來對(duì)評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)客觀性的要求越來越高，如何排除拍攝及分析時(shí)的隨意性*已成為研究中的難題，單純對(duì)特定部位進(jìn)行單獨(dú)觀察及拍攝的方法已無法解決這一難題。
一體化熒光顯微成像系統(tǒng)BZ-X800僅需確定切片外周的4點(diǎn)，即可通過自動(dòng)拍攝圖像并可高精度拼接圖像的“圖像拼接功能"，獲得切片整體的高精細(xì)圖像，此類難題也將迎刃而解。
在以下案例中，為使胰臟切片完整納入1張圖像內(nèi)，使用Plan Apochromat4倍鏡頭，并通過圖像拼接功能進(jìn)行橫向3張×縱向5張圖像的自動(dòng)拍攝及拼接。
* 排除隨意性
隨意是指在判斷標(biāo)準(zhǔn)上沒有邏輯必然性，僅憑借即興判斷，排除隨意性就是排除這樣的隨意狀態(tài)。論文重視的是“客觀性"和“再現(xiàn)性"，使用顯微鏡拍攝的圖像被認(rèn)為對(duì)這2點(diǎn)有重大影響。在切片的局部圖像中，會(huì)出現(xiàn)拍攝者隨意拍攝對(duì)自己有利的部位的案例，但是拍攝沒有接縫的高分辨率的整體像，可排除拍攝者的隨意性，獲得客觀性高的評(píng)價(jià)。
使用物鏡：Plan Apochromat 4X
圖像拼接：5張 × 3張
如果引進(jìn)一體化熒光顯微成像系統(tǒng)BZ-X800
針對(duì)無法全部進(jìn)入視野的大切片，一邊移動(dòng)載物臺(tái)一邊獲取圖像，將拍攝的圖像拼接起來，即可合成1張高分辨率圖像。
即使標(biāo)本有傾斜、高低差，也能在Z方向獲取多張圖像，只從拍攝的圖像中合成焦點(diǎn)對(duì)準(zhǔn)的部分，可構(gòu)建焦點(diǎn)對(duì)準(zhǔn)整個(gè)標(biāo)本的全幅對(duì)焦圖像。
通過消除散射光影響導(dǎo)致的熒光模糊的“去霾處理功能"，可拍攝對(duì)比度高的清晰圖像。
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