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            目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司>>科研細(xì)胞>>原代細(xì)胞>> 復(fù)蘇/凍存人破骨細(xì)胞

            人破骨細(xì)胞
            • 人破骨細(xì)胞
            參考價 面議
            具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
            參考價 面議
            具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
            • 品牌 ATCC
            • 型號 復(fù)蘇/凍存
            • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
            • 所在地 上海市
            屬性

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            更新時間:2024-07-09 11:48:10瀏覽次數(shù):345評價

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            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5*10^5
            貨號 YLK-XB0603h 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
            主要用途 科研 組織來源 骨髓
            人破骨細(xì)胞分離自骨組織和骨髓;破骨細(xì)胞是骨組織中的多核巨細(xì)胞,位于骨組織表面的淺凹處。目前一般認(rèn)為破骨細(xì)胞是分離自骨骼外的造血系統(tǒng),其前體可能屬于造血干細(xì)胞的前單核細(xì)胞。

            人破骨細(xì)胞

            產(chǎn)品名稱 :人破骨細(xì)胞

            產(chǎn)品貨號 :YLK-XB0603h

            組織來源 :骨髓

            產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶


            細(xì)胞簡介:

            破骨細(xì)胞分離自骨組織和骨髓;破骨細(xì)胞是骨組織中的多核巨細(xì)胞,位于骨組織表面的淺凹處。目前一般認(rèn)為破骨細(xì)胞是分離自骨骼外的造血系統(tǒng),其前體可能屬于造血干細(xì)胞的前單核細(xì)胞。

            破骨細(xì)胞的主要功能是維持骨吸收和骨形成的相對平衡,若失去這種平衡則發(fā)生病理性變化。因此多數(shù)學(xué)者從破骨細(xì)胞著手研究破骨細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、功能探討骨吸收,形成相互平衡的機制。但破骨細(xì)胞是一種終末分化細(xì)胞,屬于不增殖細(xì)胞群,不能增殖和傳代,只能進行原代培養(yǎng)且存活時間較短。


            細(xì)胞特性
            1) 組織來源于人的正常關(guān)節(jié)組織。本細(xì)胞為終末分化細(xì)胞,增殖能力很弱,建議客戶收到細(xì)胞后直接用于后續(xù)實驗,不要進行擴增培養(yǎng)。

            2) 細(xì)胞鑒定:抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP)為陽性。
            3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
            4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

            5) 細(xì)胞生長方式:圓形,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。


            質(zhì)量檢測

            優(yōu)利科生物實驗室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。


            培養(yǎng)信息

            培 養(yǎng)  基 : 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
            換液頻率 : 每2-3天換液一次
            生長特性 : 貼壁
            細(xì)胞形態(tài) : 多核巨細(xì)胞
            傳代特性 : 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
            傳代比例 : 不傳代
            消 化  液 : 0. 25% 胰蛋白/酶
            培養(yǎng)條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%


            客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進行操作

            1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

            2. 貼壁細(xì)胞消化
            1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
            2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
            3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
            4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
            3. 細(xì)胞收貨脫落
            1) 收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
            2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
            3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
            4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
            5) 原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
            4. 細(xì)胞實驗

            因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。


            注意事項

            1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

            2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
            3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
            4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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