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基本原理
細胞凍存時保存細胞的最基本方法,當不加保護劑直接凍存細胞時,細胞內(nèi)和外環(huán)境中的水會形成冰晶,從而引起細胞死亡。因此,正常情況下凍存細胞,通常會向培養(yǎng)液中加入保護劑,使用逐步降低溫度的方法,以減少凍存過程中細胞內(nèi)冰晶形成、保護細胞。
注意事項
1、凍存細胞選擇細胞增殖旺盛、情況穩(wěn)定、無污染、處于對數(shù)生長期的細胞。
2、實驗操作過程必須遵循無菌操作。
3、細胞凍存液的配方應(yīng)根據(jù)細胞的類型進行調(diào)整,摸索對應(yīng)細胞最適的配方。
4、細胞凍存過程,降溫速率要小,遵循慢凍原則,可借助程序降溫盒來完成。
5、凍存細胞要做好標記,名稱、日期、凍存人等。
6、選擇質(zhì)量好的凍存管進行細胞凍存,防止管凍裂。
7、凍存細胞前要進行細胞計數(shù),建議一管中細胞數(shù)量為106。
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