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            深圳市安培生物科技有限公司
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            PCR技術

            時間:2025/5/12閱讀:44
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            PCR(聚合酶鏈式反應)技術由美國生物化學家凱利·穆利斯于1983年發(fā)明,其核心原理是通過高溫變性、低溫退火和適溫延伸三個步驟的循環(huán),利用DNA聚合酶特異性擴增目標DNA片段。


            早期的PCR擴增受限于耐高溫酶的缺失,效率非常低,因此在科研實驗領域接受度并不高。

            直至1986年,水生棲熱菌來源的Taq酶的應用,才實現(xiàn)PCR穩(wěn)定、自動化的高效擴增。

            PCR實驗技術一直以來不斷發(fā)展,例如基于普通PCR技術通過優(yōu)化反應流程而衍生的巢式PCR、基于熱啟動酶提高擴增特異性的Hot start PCR、基于熒光檢測技術而發(fā)展qPCR、基于芯片微孔擴增實現(xiàn)更高精度分析的數(shù)字PCR等。
            一般,正常的PCR反應過程會經(jīng)歷3個核心階段:
            1 高溫95℃解開DNA模板(熱變性)
            2 降溫45-60℃使特異性引物與單鏈DNA互補結合(退火)
            3 再次升溫至72℃,耐熱Taq DNA聚合酶沿模板從引物3'端開始合成互補鏈(延伸)
            圖片



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