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            深圳市安培生物科技有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第5年

            19126518388

            血清系列
            細(xì)胞轉(zhuǎn)染
            支原體清除
            細(xì)胞凍存
            實(shí)驗(yàn)耗材
            分子試劑
            細(xì)胞增殖與凋亡
            Biozellen系列
            培養(yǎng)基
            ELISA試劑盒
            TOYOBO(東洋紡)
            ZYMO RESEARCH
            Greiner(格瑞納)
            IKA(艾卡)
            化學(xué)發(fā)光底物(ECL)
            PROSPEC系列
            Epigentek系列
            微生物檢測(cè)
            細(xì)胞生物學(xué)
            Corning康寧
            解離試劑
            細(xì)胞類-實(shí)驗(yàn)耗材
            原代細(xì)胞
            植物檢測(cè)系列試劑盒
            SERANA
            BSA
            細(xì)胞系
            生化試劑盒
            環(huán)境檢測(cè)系列試劑盒(AKEN)
            類器官培養(yǎng)
            緩沖器和解決方案
            生物三凝膠基質(zhì)
            細(xì)胞因子分子
            生物樣本庫(kù)
            蛋白研究系列
            修飾檢測(cè)試劑盒

            從有限的細(xì)胞中提取 RNA

            時(shí)間:2023/4/21閱讀:1180
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            材料與儀器

            LCM 帽子
            乙醇 糖原 RNA 提取試劑盒 超純水
            移液器

            步驟

            一、材料

            1. 緩沖液、試劑和溶液

            75% 乙醇 (超純水配制)

            糖原,5 mg/ml(Ambion,Austin,TX)

            StratageneRNA 提取試劑盒(200345,StratageneCloningSystems,LaJolla,CA),

            包括變性溶液、飽和酚 (存于 4°C)、β-巰基乙醇 (存于 4°C)、氯仿:異戊醇、

            2mol/L 乙酸鈉、異丙醇。或者使用 PicoPureRNA 分離試劑盒(KIT0202,Arcturus,

            MountainView,CA)

            DEPC 處理的超純水 (BiotecxLaboratories,Houston,TX)(4°C 儲(chǔ)存)

            2. 特殊設(shè)備

            移液器

            無(wú) RNA 酶的 1.5 ml 管子

            3. 細(xì)胞和組織

            來(lái)自方案 3 的 LCM 帽子

            二、方法

            1. 加入 200ul 變性溶液和 1.6ulβ-巰基乙醇到 0.5 ml 管子中。

            2. 將 LCM 帽子插入管子,渦旋 5s。

            3. 倒置管子孵育 5 min。

            4. 移去 LCM 帽子。這一步獲得的樣品可以在-80°C 保存 6 個(gè)月。

            5. 將溶液轉(zhuǎn)移到 1.5 ml 管子中。

            6. 加入 2ul2mol/L 的乙酸鈉,溫和混勻。

            7. 加入 220ul 水飽和的酚(底層),溫和混勻。

            8. 加入 60ul 氯仿:異戊醇,劇烈晃動(dòng)。

            9. 放于冰上 15 min。

            10.14000r/min4°C 離心 30 min。

            11. 吸上層溶液到新管子中。

            12. 加入 2ul 糖原(最終濃度 10~150ug/ml)。

            13. 加入 200ul 冷異丙醇。

            14.-80°C 過(guò)夜。


            深圳安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技術(shù)實(shí)力、壹流的經(jīng)營(yíng)管理水平和完善的市場(chǎng)銷售體系的生物高科技企業(yè)??偛吭O(shè)在廣東,服務(wù)面向全國(guó)。安培生物集進(jìn)口試劑、實(shí)驗(yàn)室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司,旨在為生命科學(xué)的發(fā)展提供壹流的產(chǎn)品與服務(wù)。本公司建立了涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、信號(hào)傳導(dǎo)和神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域的產(chǎn)品供應(yīng)線,在各個(gè)領(lǐng)域內(nèi)向用戶提供世界前沿水平和質(zhì)量穩(wěn)定的產(chǎn)品,安培生物致力于為廣大的科研機(jī)構(gòu)、高等院校等優(yōu)質(zhì)客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、技術(shù)支持與服務(wù)。


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