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            深圳市安培生物科技有限公司
            中級會(huì)員 | 第5年

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            染料攝取法測定細(xì)胞生存力實(shí)驗(yàn)

            時(shí)間:2022/12/13閱讀:1235
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            原理

            細(xì)胞懸液用碘化丙啶和二乙酰熒光素的混合液染色,用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測。

            材料與儀器


            步驟


            材料

            無菌

            單細(xì)胞懸液
            雙醋酸熒光素,10ug/ml,溶于 HBSS
            碘化丙啶,500ug/ml

            非滅菌

            熒光顯微鏡
            濾光片
            熒光素:激發(fā) 450/590 nm ,發(fā)射 LP 515 nm
            碘化丙啶:激發(fā) 488nm ,發(fā)射 615 nm

            操作步驟

            1. 細(xì)胞懸液的制備與染料排斥法相同(見方案 22.1),但是生長液中不含酚紅。
            2. 以 1 : 10 的比例加入熒光素染料混合液,二乙酰熒光素的終濃度為 l ug/ml,碘化丙啶的終濃度為 50ug/ml。 :
            3. 將細(xì)胞置于 37°C , 溫育 10 min。
            4. 將一滴細(xì)胞滴在載玻片上,蓋上蓋玻片,用熒光顯微鏡觀察。


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