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            深圳市安培生物科技有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第5年

            19126518388

            血清系列
            細(xì)胞轉(zhuǎn)染
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            細(xì)胞凍存
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            SERANA
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            緩沖器和解決方案
            生物三凝膠基質(zhì)
            細(xì)胞因子分子
            生物樣本庫
            蛋白研究系列
            修飾檢測(cè)試劑盒

            qPCR中的絕對(duì)定量是什么?

            時(shí)間:2021/10/14閱讀:4576
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            絕對(duì)定量目的是使用PCR測(cè)定目的基因在樣本中的數(shù)量,即拷貝數(shù)。


            在絕對(duì)定量中,想要得到目的基因的拷貝數(shù),需要制作標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。制作標(biāo)準(zhǔn)曲線圖需要將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至不同濃度,作為模板進(jìn)行PCR。標(biāo)準(zhǔn)品是已知濃度的模板。


            結(jié)束PCR后,以測(cè)得的CT值為縱坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品濃度的對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。


            對(duì)待測(cè)樣品的目的基因進(jìn)行檢測(cè)時(shí),只需要將得到的CT值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線圖,即可計(jì)算出樣品中目的基因的拷貝數(shù)。


            需要注意的是:

            1、標(biāo)準(zhǔn)品必須來源可靠、濃度已知

            2、標(biāo)準(zhǔn)品要和待測(cè)樣品要同時(shí)在儀器中擴(kuò)增

            3、只能根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品覆蓋的濃度范圍,進(jìn)行樣品濃度的推測(cè)

            qPCR中的絕對(duì)定量是什么?

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