人軟骨細(xì)胞特點和傳代步驟

　　人軟骨細(xì)胞，外文名chondrocyte，是軟骨細(xì)胞因在軟骨組織中的存在部位不同，其形態(tài)亦異。

　　人軟骨細(xì)胞特點：

　　人軟骨細(xì)胞（Chondrocyte）; 幼稚的軟骨細(xì)胞位于軟骨組織的表層，單個分布，體積較小，呈橢圓形，長軸與軟骨表面平行，越向深層的軟骨細(xì)胞體積之間增大呈圓形，細(xì)胞核圓形或卵圓形，染色淺，細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性，常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的軟骨細(xì)胞多2~8個成群分布于軟骨陷窩內(nèi)，這些軟骨細(xì)胞由同一個母細(xì)胞分裂增殖而成，稱為同源細(xì)胞群。電鏡下，軟骨細(xì)胞有突起和皺褶，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中，軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形，在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。

　　軟骨細(xì)胞埋藏在軟骨間質(zhì)內(nèi)，它所存在的部位為一小腔，稱為軟骨陷窩（cartilage lacuna）。在HE染色標(biāo)本上，陷窩周圍的軟骨基質(zhì)呈強(qiáng)嗜堿性，染色很深，稱軟骨囊（cartilage lacuna）。同源細(xì)胞群中的每個軟骨細(xì)胞分別圍以軟骨囊。

　　人軟骨細(xì)胞傳代步驟：

　　如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。