牛血清白蛋白BSA的分餾

時間：2023/9/25閱讀：1192

牛血清白蛋白Albumin from bovine serum,BSA,是牛血清中的簡單蛋白，是血液的主要成分（38g/100ml），分子量66-68kD，等電點(diǎn)4.8，含氮量16%，含糖量0.08%。僅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581個氨基酸殘基組成，其中35個半胱氨酸組成17個二硫鍵，在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質(zhì)結(jié)合。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用，貢獻(xiàn)80%的滲透壓、PH緩沖作用、營養(yǎng)作用，載體作用，可以攜帶眾多的物質(zhì)進(jìn)行循環(huán)，包括脂肪酸，金屬離子，膽紅素，激素和藥物。

牛血清白蛋白Albumin from bovine serum,BSA，又稱為組分V，或Cohn V，名稱起源于BSA分餾法Cohn 冷乙醇法，Cohn法仍然是目前非常普遍的BSA分餾法，除了了冷乙醇法，目前主要的還有熱休克法和色譜層析法。

一、 Cohn 冷乙醇法

Cohn 冷乙醇法是由哈佛大學(xué)Edwin Cohn教授于1946年發(fā)明的，基于戰(zhàn)爭創(chuàng)傷治療對注射級別的蛋白的大規(guī)模需求，Cohn教授在較低的溫度下改變血漿的乙醇濃度和PH值，使其所含蛋白在不同的乙醇濃度下析出，在第五個析出的組分中主要成分即為BSA，所以BSA又稱組分V或Cohn V。

Cohn 法是早期的BSA分餾法，為后續(xù)的BSA分餾提供了重要的思路，但是Cohn法過程中血漿蛋白涉及乙醇和低PH酸變性，以及多種雜蛋白干擾，所以分餾的BSA的質(zhì)量上差強(qiáng)人意，相比其他更先進(jìn)的分餾法，存在許多問題：

BSA蛋白變性,片段化，活性低；

BSA純度較低，雜質(zhì)含量高；

BSA產(chǎn)量低；

適用一般實(shí)驗(yàn)，很難用于細(xì)胞培養(yǎng)。

二、熱休克法

Cohn 法為大規(guī)模生產(chǎn)BSA提供了思路，但是因?yàn)樯婕芭R床使用，生產(chǎn)的BSA需要進(jìn)行肝炎病毒滅活，血漿在9%乙醇和PH6.5的時候加熱至68度；熱休克法一般需要添加辛酸維持BSA不被變性。

熱休克法生產(chǎn)的BSA產(chǎn)量高，純度也高，逐漸取代Cohn法成為BSA分餾主要方法，但是熱休克法BSA也有一些缺陷：

BSA蛋白高溫變性，活性低；

辛酸對細(xì)胞有損傷，不適合細(xì)胞培養(yǎng)；

純度低，加熱會產(chǎn)生很多變性BSA多聚體和一些片段化BSA，同時也會產(chǎn)生很多其他變性蛋白。

下面是biosera品牌下的牛血清白蛋白：

1. PM-T1725

牛血清白蛋白 (BSA) 凍干 pH~7

100克/500克/1000克

2. PM-T1726

牛血清白蛋白 (BSA) 無蛋白酶凍干

100克/500克/1000克

3. PM-T1727

牛血清白蛋白 (BSA) 不含脂肪酸凍干

100克/500克/1000克

4. SA-296

牛血清白蛋白 (BSA) 30%

1000毫升

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牛血清白蛋白BSA的分餾

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