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甘露醇卵黃培養(yǎng)基基礎(chǔ)原理和使用方法
閱讀：452 發(fā)布時(shí)間：2024-7-19
一、試驗(yàn)原理：
用于分離培養(yǎng)病原性金黃SE葡萄球菌。
蛋白胨和牛肉粉提供氮源、維生素和生長(zhǎng)因子；D—甘露醇為可發(fā)酵糖類；7.5%濃度氯化鈉可抑制除葡萄球菌外的大部分微生物的生長(zhǎng)；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑；酚紅為pH指示劑，金黃SE葡萄球菌可分解培養(yǎng)基中的甘露醇產(chǎn)酸，使菌落周圍變黃，并能降解卵黃中的卵磷脂使菌落產(chǎn)生暈圈。
二、培養(yǎng)基配方（g/L）：
蛋白胨 | 10.0 |
D-甘露醇 | 10.0 |
牛肉粉 | 2.5 |
氯化鈉 | 75.0 |
酚紅 | 0.025 |
瓊脂 | 15.0 |
pH 7.4±0.2 25℃ | |
三、試驗(yàn)方法：
粉體裝培養(yǎng)基的使用：
1. 稱取本品112.5g，加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中，煮沸1分鐘，121℃高壓滅菌15分鐘，待培養(yǎng)基冷卻至45-50℃時(shí)，無(wú)菌操作，加入50%卵黃乳液30ml，搖勻，傾入無(wú)菌平皿，備用。
2. 制備質(zhì)控菌液。
3. 選擇合適稀釋度的質(zhì)控菌液0.1ml，均勻涂布于平板上，每一稀釋度接種兩個(gè)平板。用1μL接種環(huán)取非目標(biāo)菌質(zhì)控菌液1環(huán)，將接種環(huán)接觸容器邊緣3次去除多余液體，在平板表面劃六條平行直線，同時(shí)接種兩個(gè)平板。
4. 36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時(shí)，記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
四、結(jié)果觀察與解釋
接種以下質(zhì)控菌株，36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時(shí)：
質(zhì)控菌株菌株編號(hào)接種量(CFU)參比或計(jì)數(shù)培養(yǎng)基方法質(zhì)控評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)其他特征大腸埃希氏菌ATCC25922//半定量G≤1/傷寒SHA門氏菌ATCC14028//G≤1/金黃SE葡萄球菌ATCC653820-200TSA定量PR≥0.7黃色菌落，菌落周圍有暈圈金黃SE葡萄球菌ATCC2592320-200PR≥0.7黃色菌落，菌落周圍有暈圈表皮葡萄球菌CMCC(B)2606920-200PR≥0.7紅色菌落，沒(méi)有暈圈
五、注意事項(xiàng)：
本培養(yǎng)基僅為細(xì)菌鑒定的一部分，需做其他補(bǔ)充試驗(yàn)。
注:本文屬海博生物原創(chuàng),未經(jīng)允許不得轉(zhuǎn)載。