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紫外分光光度計(jì)的基本原理和應(yīng)用
紫外分光光度計(jì)基本原理：
分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見輻射光后，發(fā)生了電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。它是帶狀光譜，反映了分子中某些基團(tuán)的信息，可以用標(biāo)準(zhǔn)光譜圖再結(jié)合其它手段進(jìn)行定性分析。
朗伯-比爾定律：當(dāng)一束平行單色光通過含有吸光物質(zhì)的稀溶液時(shí)，溶液的吸光度與吸光物質(zhì)濃度、液層厚度乘積成正比，即A= kcl
式中比例常數(shù)k與吸光物質(zhì)的本性，入射光波長(zhǎng)及溫度等因素有關(guān)。c為吸光物質(zhì)濃度，l為透光液層厚度。
紫外分光光度計(jì)應(yīng)用：
分光光度計(jì)已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器。常用于核酸、蛋白定量以及細(xì)菌生長(zhǎng)濃度的定量。我們實(shí)驗(yàn)室主要是用來測(cè)物質(zhì)的光度以求得物質(zhì)的濃度或者酶活。