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非洲豬瘟檢測PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)@競道了解JD-PCR16Construction of PCR Laboratory for detection of African classical swine fever

　　非洲豬瘟疫情發(fā)生兩年多以來，養(yǎng)殖從業(yè)人員對于非洲豬瘟疫情的認(rèn)識從最初的漠不關(guān)心，到談非色變，如今多數(shù)豬場已經(jīng)找到了防控非洲豬瘟的辦法，發(fā)現(xiàn)非洲豬瘟可防可控，并不可怕。目前，養(yǎng)豬業(yè)通過精準(zhǔn)檢測發(fā)現(xiàn)病原，同時有效執(zhí)行生物安全措施使得非洲豬瘟防控取得了可喜的進(jìn)展，可有效遏制疫情發(fā)生和蔓延。

　　非洲豬瘟在我國暴發(fā)之初，養(yǎng)殖從業(yè)人員對于生物安全管理存在畏難心理，對非洲豬瘟病毒了解不夠，普遍認(rèn)為生物安全太難，無法有效執(zhí)行。發(fā)生非洲豬瘟后，精準(zhǔn)清除執(zhí)行不到位，以至于幾乎全軍覆沒，損失慘重。從今年很多豬場的經(jīng)驗(yàn)來看，生物安全真正落實(shí)到位是可行且行之有效的。另外，選擇敏感、穩(wěn)定、性能優(yōu)異的檢測方法，結(jié)合有效的阻斷措施后，精準(zhǔn)清除的成功率非常高。

　　非洲豬瘟診斷目前*、使用最多的方法是熒光定量PCR檢測。熒光定量PCR檢測系統(tǒng)由熒光定量PCR儀、熒光定量PCR檢測試劑和耗材、核酸提取儀、核酸提取試劑和耗材等組成。設(shè)備、試劑和耗材選擇和搭配不當(dāng)，可能導(dǎo)致檢測結(jié)果不準(zhǔn)確。

　　熒光定量PCR是一種非常敏感的檢測方法。實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常開展檢測工作，一旦實(shí)驗(yàn)室管理和環(huán)境控制沒有執(zhí)行到位，就存在由于交叉污染出導(dǎo)致假陽性的風(fēng)險，進(jìn)而帶來臨床上誤殺豬只的嚴(yán)重后果

　　非洲豬瘟野毒感染時血液和組織中病毒載量非常高，經(jīng)常檢測到Ct值15左右的樣本。樣本處理和提取的過程中需要進(jìn)行離心操作，這些高濃度的樣本離心時容易造成氣溶膠污染。對于血液和組織樣本，檢測非洲豬瘟病毒應(yīng)該盡可能減少離心操作，這類樣本病毒載量高、樣本較純凈，可以采用免提取檢測。

　　實(shí)驗(yàn)室如果長期檢測陽性樣本，擴(kuò)增產(chǎn)物中高濃度的目的片段很容易擴(kuò)散到空氣中并不斷累積導(dǎo)致氣溶膠污染。

　　核酸自動提取儀可顯著提高實(shí)驗(yàn)效率，然而，養(yǎng)殖企業(yè)實(shí)驗(yàn)室大多使用中小型核酸自動提取儀，并且沒有適當(dāng)?shù)姆牢廴敬胧?，在樣本處理過程中可能出現(xiàn)交叉污染。相對于氣溶膠污染，樣本處理過程中交叉污染導(dǎo)致的假陽性概率較小。

　　儀器特點(diǎn)

　　1.體積小，重量輕，易于攜帶。輕松滿足外出實(shí)驗(yàn)的需求。

　　2.內(nèi)置10寸高清電容屏PDA，觸屏操作，簡便快捷。

　　3.Marlow高品質(zhì)Peltier制冷片，結(jié)合德國gdPT1000溫度傳感器以及電性電阻加熱補(bǔ)償邊緣的溫度控制模式，最大升溫速度7℃，最大降溫速度5℃，大大縮短實(shí)驗(yàn)時間。

　　4.整板3s快速采光模式，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果孔位一致性。

　　5.簡潔直觀的軟件引導(dǎo)，輕松開啟檢測實(shí)驗(yàn)。

　　三、非洲豬瘟PCR檢測儀應(yīng)用領(lǐng)域

　　□ 基礎(chǔ)科學(xué)研究

　　□ 病原體檢測

　　□ 肉制品摻假

　　□ 轉(zhuǎn)基因檢測

　　□ 食品安全檢測

　　□ 藥物開發(fā)及合理用藥

　　□ 基因表達(dá)

　　□ 水體監(jiān)測