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            技術文章

            qPCR-實時熒光定量PCR探針法與染料法的優(yōu)缺點

            閱讀:1055          發(fā)布時間:2022-8-16

            qPCR


            即實時熒光定量PCR,就是在PCR的擴增過程中,通過熒光的信號,對PCR的進程進行實時的定性、定量檢測



            探針法與染料法的優(yōu)缺點


            1. 探針法通過探針可以增加反應收集信號的特異性,只有探針結合的片段上發(fā)生擴增才能收集到信號,能夠用多重體系反應的方法,能夠預測和提前進行反應條件的優(yōu)化,缺點是要合成探針,成本高,周期長。

            2. 染料法經濟實惠,可以做溶解曲線,分析全部PCR產物的TM值,缺點就是特異性沒有探針法好。



            結果展示




            qPCR(圖1)qPCR(圖2)


            實驗周期及交付標準


            實驗周期:1-2周

            交付標準:擴增曲線、溶解曲線、Ct值、引物、實驗報告(實驗步驟、試劑、儀器等)



            需確認的信息


            1. 目的基因及種屬

            2. 樣本種屬及類型(組織、細胞等)

            3. 樣本數(shù)量

            4. 是否提供引物

            5. 數(shù)據統(tǒng)計與分析要求


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