細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)用于檢測(cè)DNA損傷引起的基因突變。通過(guò)檢測(cè)受試物質(zhì)對(duì)受試菌株某些特制突變體的突變能力，即使該菌株從組氨酸/色氨酸依賴型突變?yōu)樵B(yǎng)型，判斷受試物質(zhì)是否為誘變劑。測(cè)試應(yīng)在有和沒(méi)有S9代謝激活系統(tǒng)的情況下同時(shí)進(jìn)行。在瓊脂培養(yǎng)基中添加微量組氨酸或色氨酸以培養(yǎng)細(xì)菌，可使細(xì)菌在最初的幾個(gè)小時(shí)內(nèi)生長(zhǎng)并表現(xiàn)為背景苔蘚。當(dāng)添加的組氨酸/色氨酸用盡時(shí)，只有突變菌才能繼續(xù)生長(zhǎng)成可見(jiàn)的反向突變菌落。下面說(shuō)說(shuō)細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)的數(shù)據(jù)處理與結(jié)果評(píng)價(jià)。
1、回復(fù)菌落計(jì)數(shù)
直接計(jì)算培養(yǎng)基上的回復(fù)菌落數(shù)，計(jì)算每個(gè)菌株每劑量三個(gè)平板上回復(fù)菌落數(shù)的平均值和標(biāo)準(zhǔn)差。
2、合并方法的結(jié)果評(píng)價(jià)
在良好的背景生長(zhǎng)條件下，試驗(yàn)菌株tal535、tal537、TA98和大腸桿菌的回復(fù)菌落數(shù)等于或大于未處理對(duì)照組的2倍，其他試驗(yàn)菌株回復(fù)菌落數(shù)等于或大于未處理對(duì)照組的2倍，有下列1和2情況之一可判定為陽(yáng)性結(jié)果：
?。?）劑量反應(yīng)關(guān)系；
?。?）一個(gè)測(cè)試點(diǎn)具有可重復(fù)的陽(yáng)性結(jié)果。
3、細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)點(diǎn)試法的結(jié)果評(píng)價(jià)
如果供試物樣紙周圍有m個(gè)較密集的回復(fù)菌落，與未處理的對(duì)照有顯著差異，可初步判定供試物突變?cè)囼?yàn)陽(yáng)性，但應(yīng)通過(guò)摻入驗(yàn)證。測(cè)試。
4、驗(yàn)證
明顯的陽(yáng)性結(jié)果無(wú)需驗(yàn)證；可疑結(jié)果應(yīng)通過(guò)其他方法驗(yàn)證；陰性結(jié)果需驗(yàn)證（即重復(fù)），改變?cè)囼?yàn)條件，如劑量間隔（改為5倍間隔）等。
5、對(duì)照組結(jié)果評(píng)價(jià)
陽(yáng)性結(jié)果表明受試物質(zhì)在受試菌株的基因組中引起點(diǎn)突變。陰性結(jié)果表明受試物質(zhì)在試驗(yàn)條件下未對(duì)試驗(yàn)菌株誘導(dǎo)基因突變。
會(huì)員.png)
7
立即詢價(jià)
您提交后，專屬客服將第一時(shí)間為您服務(wù)