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藥物是不能亂吃的,需要在醫(yī)生的指導(dǎo)下服用!重組人干擾素α2b又叫長生扶康,是一種微黃色或白色疏松體,溶解后為澄明液體,無肉眼可見的不溶物。重組人干擾素α2b通過肌肉或皮下注射,血液濃度達(dá)峰時(shí)間為3.5~8小時(shí),消除半衰期為4~12小時(shí)。腎臟分解代謝為干擾素主要消除途徑,而膽汁分泌與肝臟代謝的消除是重要途徑。肌內(nèi)注射或皮下注射的吸收超過80%。重組人干擾素α2b用法用量1.慢性乙型肝炎:皮下或肌內(nèi)注射,3~6×106IU/日,連用四周后改為3次/周,連用16周以上。2.慢性粒細(xì)胞白血病:3~5×1
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哺乳動(dòng)物細(xì)胞真核表達(dá)產(chǎn)物接近于天然高等生物蛋白質(zhì)分子
哺乳動(dòng)物細(xì)胞真核表達(dá)系統(tǒng)在表達(dá)過程中有翻譯后修飾和折疊的功能,這一特點(diǎn)使其蛋白更接近天然蛋白,具備天然蛋白必須的空間結(jié)構(gòu)和修飾,與天然蛋白有相同的生物活性,哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)在功能蛋白、抗體生產(chǎn)、臨床疫苗的研發(fā)和生產(chǎn)中應(yīng)用較為廣泛。原核表達(dá)系統(tǒng)具有表達(dá)水平高、操作簡單、周期短、易于大規(guī)模高密度培養(yǎng)、成本低等優(yōu)點(diǎn),而對于全抗體和糖蛋白類生物藥物來說,表達(dá)產(chǎn)物多肽鏈的折疊、二硫鍵的形成、糖基化的有無以及糖基化的類型常常影響表達(dá)產(chǎn)物的合成分泌、生物活性、體內(nèi)穩(wěn)定性以及免疫原性等特性。由于原核細(xì)胞缺少 -
重組蛋白真核表達(dá)系統(tǒng)技術(shù)平臺(tái)的特色
重組蛋白作為生物制藥在醫(yī)學(xué)中作用顯著,一般用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的乳腺產(chǎn)生。重組蛋白真核表達(dá)包括酵母表達(dá)系統(tǒng)、桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)、腺病毒表達(dá)系統(tǒng)等。一般可以正確折疊,包含各種修改。但是價(jià)格高,周期長。重組蛋白真核表達(dá)系統(tǒng)技術(shù)平臺(tái)的特色快速、highly-stringent篩選:只篩選到高表達(dá)穩(wěn)定株;4~5個(gè)月獲得穩(wěn)定高表達(dá)細(xì)胞株(常規(guī)方法要9~12個(gè)月)高效表達(dá):*啟動(dòng)子和*分泌信號肽,很容易達(dá)到30p/c/d/以上(傳統(tǒng)方法需要用藥物篩選9~11輪以上才能達(dá)到)穩(wěn)定表達(dá):表達(dá)質(zhì)粒上的AGE穩(wěn)定子 -
真核細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)支原體污染表現(xiàn)以及解決方式
支原體是一種特殊的微生物,在哺乳動(dòng)物(包括人類)、爬行動(dòng)物、昆蟲和植物中廣泛分布。它是小、較為簡單的可自我復(fù)制的原核生物,大小僅為0.2-0.8um。支原體的基因組僅為0.58-2.20Mb,其自身生物合成能力有限,因此大部分營養(yǎng)物質(zhì)都要依賴于宿主。在真核細(xì)胞培養(yǎng)過程中,支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%,因而細(xì)胞培養(yǎng)過程中被支原體污染是一個(gè)世界性的難題。細(xì)胞培養(yǎng)中常遇見的有細(xì)菌污染、真菌污染、支原體污染、病毒污染等。說起支原體污染,估計(jì)細(xì)胞培養(yǎng)的同學(xué)就開始犯愁了,細(xì)胞培養(yǎng)的老手都知道,支原體污染非常不 -
化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞的規(guī)范操作方法
化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞是常規(guī)克隆和亞克隆實(shí)驗(yàn)應(yīng)用較為合適的解決方案。經(jīng)氯化鈣處理,促進(jìn)質(zhì)粒DNA黏附于感受態(tài)細(xì)胞膜上。將感受態(tài)細(xì)胞通過水浴熱激,使細(xì)胞膜孔打開,從而質(zhì)??梢赃M(jìn)入。操作方法:(以下操作均按無菌條件的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行)1、取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中,如需分裝可將剛?cè)诨?xì)胞懸液分裝到無菌預(yù)冷的離心管中,置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100μl,可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。應(yīng)注意所用DNA體積不要超過感受態(tài)細(xì)胞懸液體積的十分之一。以下實(shí)驗(yàn)以100μl感受態(tài)細(xì)胞為例。2、向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入 -
不管是從應(yīng)用還是制備,多克隆抗體與單克隆抗體都有很大區(qū)別
多克隆抗體就是用一種包含多種抗原決定簇的抗原免疫動(dòng)物,刺激機(jī)體多個(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生針對多種抗原表位的不同抗體后,所獲得的免疫血清實(shí)際上是含有多種抗體的混合物。由一種抗原決定簇刺激機(jī)體,由一個(gè)B淋巴細(xì)胞接受該抗原刺激所產(chǎn)生的抗體稱之為單克隆抗體。由多種抗原決定簇刺激機(jī)體,相應(yīng)地就產(chǎn)生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體。多克隆抗體與單克隆抗體的應(yīng)用比較(1)多克隆抗體的應(yīng)用一種良好的多克隆抗血清含有抗某種抗原不同表位的多種抗體。由于多克隆抗血清通常包含抗某一抗原的不同表位的抗 -
M15化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞操作方法看似簡單,細(xì)節(jié)很重要
M15化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞是采用大腸桿菌M15菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA的化學(xué)轉(zhuǎn)化。它能表達(dá)lac阻遏蛋白,抑制T5強(qiáng)啟動(dòng)子的表達(dá)。同時(shí),pREP4還賦予宿主菌株卡那霉素抗性。pREP4是從pACYC改造而來的,含有p15A復(fù)制子。它能夠與所有帶ColE1復(fù)制起點(diǎn)的質(zhì)粒共存。主要特點(diǎn)使用pUC19質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達(dá)108,-80℃保存幾個(gè)月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。recA1和endA1突變阻止對克隆DNA的修飾或?qū)λ拗骶旧獶NA的重組,提高純化質(zhì)粒的產(chǎn)量和質(zhì)量。M15化學(xué)感受態(tài) -
重組人白介素-11藥物副反應(yīng)(一般不良反應(yīng))
重組人白介素-11是由造血微環(huán)境基質(zhì)細(xì)胞和部分間葉細(xì)胞產(chǎn)生的多效性細(xì)胞因子。IL-11通過與細(xì)胞表面特異性受體-配體結(jié)合鏈IL-11Rα結(jié)合,并連接到信號傳導(dǎo)鏈可溶性糖蛋白130(gp130)后發(fā)揮其生物學(xué)作用,可以直接作用于骨髓巨核系祖細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞、上皮細(xì)胞和肝細(xì)胞,具有促進(jìn)巨核細(xì)胞和血小板生成、調(diào)控免疫、抗炎和保護(hù)黏膜上皮等多種功能。IL-11的促造血功能主要表現(xiàn)在直接刺激造血干細(xì)胞和巨核系祖細(xì)胞的增殖,誘導(dǎo)巨核細(xì)胞分化成熟,促進(jìn)高倍性巨核細(xì)胞生成,增加單個(gè)巨核細(xì)胞血小板的產(chǎn)量,從