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使用安捷倫 Intuvo 9000氣相色譜系統(tǒng)進行殘留溶劑分析
閱讀：1277 發(fā)布時間：2020-10-13前言： USP <467> 規(guī)定了一種分析藥物中殘留溶劑的方法。在產(chǎn)品生產(chǎn)過程中選擇合適的溶劑可提高產(chǎn)量或影響所合成產(chǎn)品的化學特性。但是，溶劑并不能增強產(chǎn)品的功效，所以必須盡可能多地將其去除以滿足產(chǎn)品規(guī)格要求和藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范1 。因此，在生產(chǎn)或純化工藝中測試殘留溶劑是生產(chǎn)過程的一個必要環(huán)節(jié)。 USP <467> 規(guī)定的單柱分析需要在配備另一根保留時間不同的分析柱的另一臺系統(tǒng)上進行確認。對傳統(tǒng)的氣相色譜系統(tǒng)來說，這種分析方法需要進行兩次單獨的分析。Agilent Intuvo 9000 氣相色譜系統(tǒng)配備用于雙火焰離子化檢測器 (FID) 的進樣口分流器，可在單次運行中進行兩次分析，分析時間縮短一半
實驗部分： Intuvo 9000 氣相色譜系統(tǒng)配備有 Agilent 7697A 頂空進樣器。制備 1 類、2A 類和 2B 類標準溶液，并根據(jù) USP <467> 方法對其進行評估。將安捷倫濃縮安瓿瓶（部件號 5190-0490）中的 1 mL 標準品和 9 mL 二甲基亞砜用水稀釋至 100 mL，制備 1 類溶液（儲備液 1）。將 1 mL 儲備液 1 用水稀釋至 100 mL 制備儲備液 2。后，將 10 mL 儲備液 2 用水稀釋至 100 mL 制備儲備液 3。儲備液 3 用于頂空樣品瓶的樣品前處理。分別將 1 mL 安捷倫 2A 類（部件號 5190- 0492）和 2B 類（部件號 5190-0513）標準品用水稀釋至 100 mL 制備各自的標準溶液。將 1 mL 各類稀釋溶液加入到 5 mL 水中制備頂空樣品瓶。使用 7697A 頂空進樣器以及配有雙柱、雙檢測器進樣口分流器的 Intuvo 9000 氣相色譜系統(tǒng)分析重復樣品。表 1 和表 2 中展示的儀器參數(shù)和之前的研究2 中用到的參數(shù)基本相同。為了反映該應(yīng)用中色譜柱性能的改進，我們選擇了不同的色譜柱：Agilent DB-624 Select 超高惰性 (UI) 色譜柱和 Agilent DB-WAX 超高惰性 (UI) 色譜柱。添加的芯片式保護柱和總線是 Intuvo 9000 氣相色譜系統(tǒng)的*部件。引入的樣品較為干凈，因而選擇跳線芯片。將其與進樣口保持相同溫度，使樣品從進樣口通過跳線芯片轉(zhuǎn)移到進樣口分流器。總線采用默認設(shè)定值。
結(jié)果與討論：每種溶劑標準品（1 類、2A 類和 2B 類）準備九個頂空樣品瓶，用于評估重現(xiàn)性（峰面積和保留時間）。對于評估的三類標準溶液，兩根色譜柱均展現(xiàn)出了出色的保留時間重現(xiàn)性。大多數(shù)分析物的保留時間重現(xiàn)性相對標準偏差 (RSD) 均低于 0.1%。峰面積重現(xiàn)性同樣出色，所有分析物在兩根色譜柱上的 RSD 均未超過 5%。多數(shù)分析物的峰面積 RSD 未超過 2%。表 1–3 給出了三類標準溶液在雙柱上的保留時間和峰面積重現(xiàn)性測定值。 1 類標準溶液的峰面積 RSD 高（表 3）。由于 1 類標準溶液經(jīng)過多級稀釋，其終濃度在三類受評估溶液中低。由于這是對樣品前處理重現(xiàn)性、儀器精度和峰積分一致性的測量，因而這種稀釋方式會導致更大的誤差。 2A 類標準溶液具有的峰面積精度（表 4），這很可能是因為其用于評估的濃度高于 1 類和 2B 類。2B 類標準溶液的濃度范圍更寬，這在其更寬的峰面積 RSD 范圍中得到了體現(xiàn)（表 5）。對于濃度較低或具有較高不對稱性的分析物（正己烷、硝基甲烷和 1,2-二甲氧基乙烷），其峰面積 RSD 比具有高響應(yīng)和對稱峰形的分析物（四氫化萘）略高。無論類別、響應(yīng)或?qū)ΨQ性如何，保留時間重現(xiàn)性均非常出色。除硝基甲烷 (0.4%) 外，其他分析物的保留時間重現(xiàn)性指標 (RSD) 均不超過 0.2%，其中大多數(shù)甚至低于 0.1%。
使用 7697A 頂空進樣器和 Intuvo 9000 氣相色譜系統(tǒng)實現(xiàn)的雙柱分析同樣可以提供出色的色譜性能，證明了雙柱同時運行具有的*性。在 1 類標準溶液中，四氯化碳顯示出的信噪比足以滿足 USP <467> 的要求（圖 1）。DB-624 Select UI 色譜柱和 DB-WAX UI 色譜柱均顯示了出色的峰對稱性和相似的響應(yīng)。DB-624 Select UI 中 1,1,1-三氯乙烷和四氯化碳良好的分離與其在 DB-WAX UI（圖 2）中難以分離的情況對比，為同時進行雙柱評估的實用性提供了實例。
對于評估的溶劑，2A 類標準溶液也表現(xiàn)出了出色的峰對稱性。可觀察到 DB-624 Select UI 和 DB-WAX UI 色譜柱間洗脫順序的顯著變化，這與根據(jù)固定相的差別而預(yù)期的結(jié)果一致（圖 3 和圖 4）。與 1 類溶劑在 DB-624 Select UI 色譜柱上關(guān)鍵分析物（四氯化碳）的分離度更高相反， DB-Wax UI 色譜柱可為 2A 類中的二甲苯異構(gòu)體提供更好的分離度。這凸顯了同時運行兩柱的優(yōu)勢。DB-624 Select UI 色譜柱對 1 類標準溶液具有更好的性能， DB-WAX UI 色譜對 2A 類標準溶液具有更好的性能，因此將二者在同一個系統(tǒng)上運行，可同時為兩種類別提供色譜分析。2B 類標準溶液為使用雙柱同時進行 USP <467> 殘留溶劑分析的優(yōu)勢提供了終實例。硝基甲烷在 DB-624 Select UI 色譜柱上響應(yīng)較低且峰形不對稱（圖 5，峰 2）。而在 DB-WAX UI 色譜柱上，其峰形和響應(yīng)均得到改善（圖 6）。硝基甲烷在 DB-624 Select UI 色譜柱和 DB-WAX UI 色譜柱間峰面積 RSD 的改善也同樣反映了這一現(xiàn)象。
結(jié)論：將配備 Agilent 7697A 頂空進樣器的 Agilent Intuvo 9000 氣相色譜系統(tǒng)配置為雙柱雙 FID 系統(tǒng)，該系統(tǒng)具有出色的重現(xiàn)性。使用該系統(tǒng)得到的結(jié)果，與之前出版的 USP <467> 在傳統(tǒng)單柱氣相色譜系統(tǒng)上得到的結(jié)果2,3 一致。九個頂空樣品瓶的峰面積精度均未超過 5%，保留時間重現(xiàn)性均未超過 0.2%。
使用雙柱同時進行 USP <467> 殘留溶劑評估具有更多優(yōu)勢。1 類殘留溶劑在 Agilent DB-624 Select UI 色譜柱上具有分離度，而 2A 類中的二甲苯異構(gòu)體在 Agilent DB-WAX UI 色譜柱上實現(xiàn)了*分離。通過為 Intuvo 9000 氣相色譜配置進樣口分流器，可同時運行兩個色譜柱，從而利用兩種固定相實現(xiàn)色譜性能的提升。此配置無需將樣品在具有不同色譜柱的兩個不同系統(tǒng)中運行兩次，可以將總分析時間縮短一半。將 7697A 頂空進樣器與配有用于雙柱雙 FID 分析的進樣口分流器的 Intuvo 9000 氣相色譜系統(tǒng)相結(jié)合，可為分析 USP <467> 殘留溶劑提供一種穩(wěn)定直接的方法，同時還可縮短分析時間。