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使用Ultivo 三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)分析食品基質(zhì)中的真菌毒素
閱讀：659 發(fā)布時(shí)間：2020-6-18摘要：本應(yīng)用簡(jiǎn)報(bào)介紹了一種高靈敏度和高精度方法，使用 Agilent Ultivo 三重四極桿質(zhì)譜儀分析玉米和花生基質(zhì)中的 12 種真菌毒素，以及黑胡椒基質(zhì)中的 5 種真菌毒素。Ultivo LC/MS 專為節(jié)省實(shí)驗(yàn)室空間，同時(shí)保持高通量分析所需的性能而設(shè)計(jì)。所有真菌毒素均可在低于歐盟委員會(huì)法規(guī) (EC) 規(guī)定的每種基質(zhì)高濃度下定量。在 Ultivo 系統(tǒng)上獲得了優(yōu)異的方法精度，低定量限下的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差 (%RSD) < 10%。將基質(zhì)干擾凈化、色譜分析和新開發(fā)的三重四極桿相結(jié)合，可靈敏、精確地檢測(cè)真菌毒素。
前言：真菌毒素是由各種作物上生長(zhǎng)的真菌產(chǎn)生的。在一定濃度和組合情況下，人類和牲畜可通過食用受污染的作物而受到真菌毒素的危害；因此，需要對(duì)食品中的真菌毒素含量進(jìn)行監(jiān)管，以大程度減小攝入風(fēng)險(xiǎn)[1]。為確保有害濃度的真菌毒素不進(jìn)入食品供應(yīng)，監(jiān)管機(jī)構(gòu)已確定高濃度 (ML)，從某些嬰兒食品中的 0.1 ppb 到某些動(dòng)物飼料中的 ppm 級(jí)水平。很有必要對(duì)各種食品基質(zhì)中低于 ML 濃度的真菌毒素含量進(jìn)行準(zhǔn)確定量分析，因?yàn)槊糠N基質(zhì)組成都會(huì)造成不同的挑戰(zhàn)。
專門設(shè)計(jì)用于解決環(huán)境和食品安全分析實(shí)驗(yàn)室所面臨的眾多挑戰(zhàn)。Ultivo 采用的創(chuàng)新技術(shù)有助于減小其總體占用面積，同時(shí)性能可與傳統(tǒng)系統(tǒng)相媲美（圖 1）。Cyclone Ion Guide 氣旋離子導(dǎo)軌、Vortex Collision Cell 渦流碰撞室和雙曲面四極桿等創(chuàng)新產(chǎn)品，能大程度提高小體積儀器的定量分析性能。這些創(chuàng)新增強(qiáng)了儀器的可靠性和穩(wěn)定性，從而延長(zhǎng)了正常運(yùn)行時(shí)間。 VacShield 真空盾和輕松更換檢測(cè)器組件減少了系統(tǒng)維護(hù)所需的時(shí)間和專業(yè)知識(shí)，使非專業(yè)質(zhì)譜用戶也可輕松操作和維護(hù)。 Agilent MassHunter 軟件套裝簡(jiǎn)化了數(shù)據(jù)采集、方法設(shè)置、數(shù)據(jù)分析和報(bào)告。該軟件縮短了從采集到報(bào)告的時(shí)間，從而提高了實(shí)驗(yàn)室分析效率和可信度。本應(yīng)用簡(jiǎn)報(bào)展示了使用新款 Ultivo 三重四極桿 LC/MS 對(duì)三種常見受監(jiān)管食品中多 12 種受監(jiān)管真菌毒素進(jìn)行靈敏而精確的定量分析。
實(shí)驗(yàn)部分：試劑與化學(xué)品本應(yīng)用中使用的所有試劑均為 H P LC 或 LC/MS 級(jí)。乙腈購自 Honeywell (Morristown, NJ, USA)，超純水產(chǎn)自配有 LC-Pak Polisher 和 0.22 µm 膜式終端過濾器濾芯的 Milli-Q Integral 水純化系統(tǒng) (EMD Millipore, Billerica, MA, USA)。甲酸 (FA) 和甲酸銨購自 Fluka (Sigma-Aldrich Corp., St. Louis, MO, USA)，氟化銨購自 Aldrich (Sigma-Aldrich Corp., St. Louis, MO, USA)。化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品購自 SigmaAldrich 或 Cayman Chemical。
樣品前處理：玉米粉、花生和黑胡椒碎購自當(dāng)?shù)仉s貨店。稱取 5 g 玉米粉、5 g 花生碎（在攪拌器中磨碎，冷凍待分析）或 2 g 黑胡椒碎，置于 50 mL 聚丙烯管中，用 10 mL 乙腈和 10 mL 含 0.2% FA 的超純水進(jìn)行萃取，然后使用旋轉(zhuǎn)搖床 (Heidolph HeiMIX Multi reax, 545-10000-00) 振搖 30 分鐘。將 Agilent QuEChERS EN 萃取鹽（部件號(hào) 5982-5650）加入萃取物中，將試管再振搖 2 分鐘，然后以 4500 rpm 的轉(zhuǎn)速離心 5 分鐘 (Sorvall Heraeus, Labofuge 400K)。使用安捷倫通用分散式固相萃取試劑盒（部件號(hào) 5982-0029）對(duì)黑胡椒萃取物進(jìn)行額外的凈化步驟。然后，用 0.4 mL 超純水稀釋 1.6 mL 所有萃取物，并用 Agilent Captiva EMR-Lipid 過濾柱（部件號(hào) 5190-1003）進(jìn)行凈化。在分析之前，按照萃取物/超純水 30:70 的比例對(duì)加標(biāo)黑胡椒萃取液進(jìn)行稀釋。圖 2 顯示了樣品前處理的流程圖。
儀器： Agilent 1290 Infinity II UHPLC • Agilent 1290 Infinity 高速泵 (G7120A) • Agilent 1290 Infinity II Multisampler，配備冷卻裝置 (G7167B) • Agilent 1290 Infinity II 高容量柱溫箱 (G7116B) Agilent Ultivo 三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng) • 安捷倫噴射流電噴霧離子源
方法表 1 匯總了 Agilent 1290 Infinity II UHPLC 條件。表 2 匯總了 Ultivo 三重四極桿參數(shù)和安捷倫噴射流 ESI 離子源參數(shù)。采用正離子模式和動(dòng)態(tài)多反應(yīng)監(jiān)測(cè) (dMRM) 進(jìn)行分析。采用具有 Quant-My-Way 功能的 Agilent MassHunter 定量分析軟件 B.09 對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行評(píng)估。
結(jié)論 ：Agilent Ultivo 三重四極桿 LC/MS 是一款創(chuàng)新質(zhì)譜儀，可以大程度降低對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作空間的需求，還可減少維護(hù)挑戰(zhàn)，使高通量實(shí)驗(yàn)室獲得高效工作環(huán)境。Ultivo 是一款體積小而功能強(qiáng)大的工具，能夠?qū)Χ喾N食品基質(zhì)中遠(yuǎn)低于規(guī)定 ML 的常見受監(jiān)管真菌毒素進(jìn)行準(zhǔn)確而靈敏的檢測(cè)。 Agilent MassHunter 軟件提供了一種采集和報(bào)告 LC/MS 數(shù)據(jù)簡(jiǎn)便易用的一體式工具。