技術文章
蛋白質藥物的生物分析研究-島津液質聯用
閱讀:617 發(fā)布時間:2019-7-8基于島津液質聯用平臺的抗體類藥物生物分析nSMOL解決方案
抗體類藥物的生物分析通常采用ELISA/LBA等傳統(tǒng)生物學方法。該類經典方法雖然靈敏度較高,但定量線性范圍窄、實驗步驟繁瑣,對于抗體藥物偶聯物(ADC),雙特異性抗體(Bi-Specific)等創(chuàng)新藥物,難度大且過程復雜。
島津公司與日本國立癌癥研究中心合作,開發(fā)出通過納米表面定向酶解抗體類藥物Fab區(qū)域的選擇性酶解技術 nSMOL: nano-Suface and Molecular-Orientation Limited proteolysis。
通過nSMOL技術方案,定量分析血漿中曲妥珠單抗:樣品經nSMOL技術處理后,一級MS譜圖如圖三所示,紅色箭頭所標示的峰來自曲妥珠單抗Fab區(qū)域肽段,其中CDR區(qū)域的特征肽段*囊括在內。肽段列表見表一。經過優(yōu)化分析,選擇線性關系良好且無干擾的IYPTNGYTR作為曲妥珠單抗定量的特征肽段之一(m/z542.8>404.7),見圖四和表二,構建MRM離子對,可以快速定量樣品中曲妥珠單抗。