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作為均相分析技術(shù)，TR-FRET技術(shù)已經(jīng)成為藥物研發(fā)領(lǐng)域重要的檢測手段。本文將從TR-FRET的原理、特點(diǎn)及HTRF技術(shù)優(yōu)勢和應(yīng)用領(lǐng)域做一個簡單的介紹。
TR-FRET 介紹
TR-FRET是TRF（Time-Resolved Fluorescence，時間分辨熒光）和FRET（Fluorescence Resonance Energy Transfer，熒光共振能量轉(zhuǎn)移）技術(shù)的綜合。
TRF技術(shù)是利用鑭系元素的熒光發(fā)射時間長的特性，通過延遲檢測的方式降低背景噪音的檢測方法。
HTRF 延遲檢測原理
FRET技術(shù)是當(dāng)供體熒光分子的發(fā)射光譜和受體熒光分子的激發(fā)光譜重疊的時候，可以將供體分子的能量共振轉(zhuǎn)移到受體分子上的技術(shù)。
與其它免疫檢測技術(shù)（以ELISA為代表）相比較，TR-FRET的特點(diǎn)：
免洗，操作簡便
數(shù)據(jù)穩(wěn)定性好
數(shù)據(jù)背景值低
易于自動化操作
目前市場上，HTRF和LANCE Ultra等技術(shù)都屬于生命科學(xué)領(lǐng)域比較成熟的TR-FRET技術(shù)，HTRF以其出色的穩(wěn)定性更是贏得了廣泛的應(yīng)用。
HTRF介紹及其特點(diǎn)
HTRF（Homogeneous Time-Resolved Fluorescence，均相時間分辨熒光）是法國Cisbio公司（已被美國PerkinElmer公司收購，試劑業(yè)務(wù)現(xiàn)更名為Revvity）于1990年代研發(fā)的基于免疫熒光檢測的技術(shù)。Cisbio公司已經(jīng)獲得HTRF的商標(biāo)。
Cisbio公司
與市場上其它TR-FRET相比，HTRF技術(shù)及其產(chǎn)品擁有產(chǎn)品優(yōu)勢：
1
技術(shù)特點(diǎn)
首先，在HTRF技術(shù)的供體設(shè)計(jì)中，科研人員將鑭系元素鎖定在的穴狀化合物（Cryptate）內(nèi)。該穴狀化合物結(jié)構(gòu)非常穩(wěn)定，對溫度、光線、pH值、二價金屬離子等均不敏感，避免了環(huán)境因素對供體鑭系元素穩(wěn)定性的影響。
其次，HTRF技術(shù)根據(jù)蛋白結(jié)構(gòu)及相互作用的特點(diǎn)，提供兩種Donor（Eu和Tb）和兩種Acceptor（XL665和d2），選用優(yōu)化的供體和受體組合，使得FRET中能量轉(zhuǎn)移更加有效。
Donor 穩(wěn)定性比較（HTRF vs 其他TR-FRET）
想了解HTRF技術(shù)的穩(wěn)定性，可以參考：
解密HTRF的高穩(wěn)定性
2
研發(fā)實(shí)力雄厚
從1990年代開始，Cisbio公司就專注于HTRF技術(shù)的開發(fā)和研究，選用HTRF的抗體和供體、受體分子，并根據(jù)客戶的實(shí)驗(yàn)反饋，及時對試劑盒和工具系列進(jìn)行不斷優(yōu)化和升級，使HTRF產(chǎn)品系列更加穩(wěn)定可靠。
3
產(chǎn)品系列豐富
HTRF系列產(chǎn)品覆蓋了大部分的藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域，從早期的GPCR領(lǐng)域研究和激酶研究到生物標(biāo)記物檢測、細(xì)胞因子檢測、信號通路檢測、Toolbox工具系列以及Tag-Lite系列檢測。
各領(lǐng)域的檢測方案（簡介見后文）
4
技術(shù)支持專業(yè)
HTRF技術(shù)2009年進(jìn)入中國以來，已經(jīng)成為藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域重要的檢測手段，為中國創(chuàng)新藥物的發(fā)展提供了解決方案。公司除了對HTRF技術(shù)的各個應(yīng)用領(lǐng)域提供詳盡的操作指南之外，還會定期發(fā)布新產(chǎn)品，支持最新的藥物研發(fā)需求，并有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)對客戶實(shí)驗(yàn)中遇到的問題進(jìn)行解答和答疑。
北京徑元是Revvity公司的試劑授權(quán)經(jīng)銷商。我們熟悉HTRF技術(shù)及其應(yīng)用領(lǐng)域，并舉辦了多場關(guān)于HTRF技術(shù)的學(xué)術(shù)講座，同時，我們與國內(nèi)研發(fā)企業(yè)和科研單位保持著密切的交流和溝通。
HTRF技術(shù)應(yīng)用領(lǐng)域簡介
1
GPCR研究的完整解決方案
HTRF技術(shù)提供cAMP（Gs、Gi）、IP-One（Gq）、GTP-binding、受體配體結(jié)合（Tag-Lite）、β-arrestin、胞內(nèi)信號分子等完整的檢測方案。
詳情請見：
GPCR檢測的完整解決方案
2激酶篩選研究
HTRF技術(shù)提供TK和STK激酶的檢測試劑盒，并對277種激酶提供明確的檢測方案和實(shí)驗(yàn)優(yōu)化條件。
詳情請見：
基于HTRF技術(shù)的激酶檢測方法
3Toolbox工具
HTRF技術(shù)提供多種標(biāo)簽抗體，用于蛋白互作和藥物研發(fā)階段中自行設(shè)計(jì)藥物篩選方案。
HTRF PPI Toolbox 產(chǎn)品列表
如果需要進(jìn)行HTRF技術(shù)的PPI實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，可以參考以下文章：
HTRF PPI 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化
HTRF技術(shù)PPI實(shí)驗(yàn)案例分享 多樣性
HTRF技術(shù)PPI實(shí)驗(yàn)案例分享 分子大小篇
HTRF技術(shù)PPI實(shí)驗(yàn)案例分享 親和力篇
也可以咨詢北京徑元來協(xié)助構(gòu)建PPI的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。
4細(xì)胞因子檢測
HTRF細(xì)胞因子檢測試劑盒覆蓋主流的因子，詳情可以參考來查詢。
細(xì)胞因子檢測方法操作簡單，更適于高通量檢測。
HTRF 細(xì)胞因子檢測基本操作流程
如果您對HTRF技術(shù)的細(xì)胞因子檢測感興趣，可以參考以下小文章：
細(xì)胞因子檢測 - HTRF&AlphaLisa技術(shù)
HTRF技術(shù)檢測新鮮血液樣品中的細(xì)胞因子
不同亞型免疫細(xì)胞參與免疫進(jìn)程的HTRF解決方案
5信號通路檢測
HTRF信號通路檢測試劑盒覆蓋大部分的信號通路分子，詳情可以參考查詢。
信號通路檢測分為兩步，細(xì)胞處理和信號檢測。一般情況，2個小時就可以完成量化穩(wěn)定的信號分子檢測，而且比WB更簡便、更省時。
HTRF 信號分子檢測基本操作流程
