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            技術文章

            Mag-Fura-2 AM鎂離子熒光探針130100-20-8物理特性

            閱讀:143          發(fā)布時間:2022-1-6

            名稱:Mag-Fura-2 AM, Cell Permeant 鎂離子熒光探針

            CAS:130100-20-8

            化學名:5-Oxazolecarboxylic acid, 2-[5-[2-[(acetyloxy)methoxy]-2-oxoethoxy]-6-[bis[2-[(acetyloxy)methoxy] -2-oxoethyl]amino]-2-benzofuranyl]-(acetyloxy)methyl ester

            同義名:Furaptra, AM ester

            分子式:C30H30N2O19

            分子量:722.56 g/mol

            結構式:


            外觀:黃色固體

            純度:≥90%

            Ex/Em:336/503 nm

            溶解性:溶于DMSO

            保存:-20oC干燥避光保存,至少一年有效。

            運輸:冰袋運輸

            產品描述:Mag-Fura-2 AM是一種胞內鎂離子指示劑,屬于紫外激發(fā)的比率型探針,與鎂離子結合的Kd值為1.9mM。與Fura-2類似,Mag-Fura-2的激發(fā)波長歷經藍色遷移從369nm到330nm。Mag-Fura-2 AM具細胞膜滲透性,只需簡單孵育,即可加載進入細胞。


            使用方法:

            1.儲存液制備

            取一管低溫保存的Mag-Fluo-4 AM,置于室溫回溫至少20min。之后加入高質量無水DMSO配制成1~5mM儲存液,比如50μgMag-Fluo-4 AM(Mw:817.65 g/mol)溶于12μl DMSO,充分溶解后,即得到5mM儲存液。

            【注意】未使用的儲存液分裝儲存在-20℃,避免反復凍融,且要避光保存。盡快使用完。

            2.操作步驟

            【注意】以下使用方法僅作參考,需根據具體的細胞類型和實驗要求做出調整。加載溫度范圍是RT~37℃,更高溫度會提高加載速度,但更低溫度能最小化染料的內在化現(xiàn)象。表面活性劑Pluronic®F-127有時加入能促進AM探針在水溶性緩沖液內的均勻分散。

            2.1 在所需溫度(25℃~37℃)預孵育細胞10min,使其離子梯度達到穩(wěn)定和平衡。

            2.2 取4μl Mag-Fluo-4 AM儲存液和5μl 20% Pluronic®F-127,加入1ml細胞培養(yǎng)液,劇烈漩渦混勻得到均勻的探針分散液。

            2.3 取250μl上述制備的探針分散液加入750μl含細胞的培養(yǎng)基內,混勻,此時得到終濃度為1~5μM的工作液,根據起始母液濃度來確定。

            2.4 根據需求探針孵育15~60min。

            2.5 細胞清洗3次,之后繼續(xù)孵育30min以保證細胞內的探針*去酯化。之后選擇合適的儀器,進行熒光測定。


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            供應商:陜西新研博美生物科技有限公司

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