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            上海吉至生化科技有限公司

            主營產(chǎn)品: 潮霉素b,DTT二硫蘇糖醇,Albumin BovineⅤ 牛血清白蛋白Ⅴ,Zeocin 博萊霉素 1.25ml -20℃ (125mg),IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 進口 100g

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            MTT比色法檢測細胞活性操作步驟(背根神經(jīng)節(jié)細胞培養(yǎng)為例)

            2023-7-24 閱讀(198)

            無菌條件下取新生一天的SD大鼠背根神經(jīng)節(jié)。
            鏡下去除神經(jīng)根和外膜,放入1ml 0.1%膠原酶中37℃消化30min,每5min搖勻一次。
            洗去膠原酶,吹打分散后,接種于預(yù)先涂有L-多聚賴氨酸的96孔培養(yǎng)板中,每孔含100μl無血清L15培養(yǎng)基,細胞約800個。
            實驗組分別加入純化的表達蛋白(分別以不同的蛋白濃度),陰性對照加入等體積表達蛋白的溶劑。
            37℃ 5%CO2培養(yǎng)48hr后,每孔加入10μl MTT,37℃ 5%CO2孵育4hr。
            加入100μl 20%的SDS處理液,37℃孵育20hr。
            用EL×800微孔酶標(biāo)儀測定OD570值,數(shù)據(jù)分析。




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