詳細介紹
小鼠脈絡膜微血管內皮原代細胞
小鼠脈絡膜微血管內皮細胞分離自眼球脈絡膜組織;脈絡膜在視網膜和鞏膜之間,含有豐富血管和色素細胞,對外力沖擊的耐受性較視網膜差,當眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過體傳到后極部時,堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用,使脈絡膜在內外兩種作用夾攻下而發(fā)生破裂和出血。脈絡膜呈暗褐色,圍繞視乳頭部有照膜,為青綠色帶金屬光澤的三角形區(qū)。脈絡膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜,由纖維組織、小血管和毛細血管組成,軟而薄,棕紅色,在鞏膜和視網膜之間,續(xù)連于睫狀體后方。脈絡膜的血循環(huán)營養(yǎng)視網膜外層,其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營養(yǎng)視網膜外層及體,并有遮光作用,使反射的物象清楚。同時對視覺系統(tǒng)起保護作用,對整個視覺有調節(jié)作用。續(xù)連于睫狀體后方,含豐富的血管和色素細胞,有營養(yǎng)和遮光作用。
英文名稱 | Mouse Choroidal Microvascular Endothelial Cells | 組織來源 | 脈絡膜組織 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產品貨號 | YS-01X7549 |
細胞形態(tài) | 內皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱:小鼠脈絡膜微血管內皮細胞
組織來源:脈絡膜組織
產品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠脈絡膜微血管內皮采用膠原酶-蛋白酶混合消化法結合密度梯度離心法、后通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的小鼠脈絡膜微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
豬腎細胞;PK-15 | 含亮膠質瘤失活蛋白4抗體 |
SEC63域內含蛋白1抗體 | 細胞連接相關蛋白1抗體 |
瘤促活化因子3抗體 | 蛋白酶體PSMD3抗體 |
調節(jié)蛋白1抗體 | 葡萄糖轉運蛋白8抗體 |
鋅指蛋白Zdhhc18抗體 | 15抗體 |
BPH-1, 人前列腺增生細胞 | 腦微血管內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
Raji細胞,人Butt`s淋巴瘤細胞 C57小鼠黑色素瘤瘤株,ME細胞 人腎近曲小管上皮細胞裂解物HRPTEpiCL | NCI-H23(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
人髓核細胞HNPC | KiMA(人胚腎上皮細胞系) 5×106cells/瓶×2 |
OP9 小鼠骨髓基質細胞 | CL-0244WISH(人羊膜細胞)5×106cells/瓶×2 |
9L-E細胞,人前列腺癌細胞 果子貍腎上皮細胞,Hed68細胞 小鼠腦脊元MN-r | 小鼠脈絡膜微血管內皮原代細胞蛋白酶體PSMD3抗體 |
冠狀動脈內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | (+)9811細胞,人胃癌細胞 人骨肉瘤細胞,SP20細胞 人胚胎眼鞏膜成纖維細胞;HFSF |
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/14/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) | HB611(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
CM-M096小鼠表皮角質形成細胞培養(yǎng)基100mL | 胎盤泌乳素抗體 |
富含亮跨膜纖連蛋白3抗體 | 人視網膜色素上皮細胞HRPEpiC |
有絲分裂原誘導基因6抗體 | 伴侶蛋白bc1同源復合體抗體 |
跨膜轉運蛋白21抗體 | BPH-1, 人前列腺增生細胞 |
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。