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 阿菲波菌屬通用PCR進(jìn)口試劑盒設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40 uL 體系）  

1. 在 N+2 個(gè) PCR 管中加入下列成分，下面以樣品數(shù)為 1 舉例（注意：如果一次使用DNA 釋放劑，*每個(gè)樣品設(shè)置兩個(gè)模板用量的 PCR 反應(yīng)，兩個(gè)反應(yīng)的模板使用量差 10 倍，由此確定*用量，以后就用效果*的那個(gè)模板用量）：

2. 輕柔混勻后上機(jī)，按下面參數(shù)進(jìn)行 PCR。

3. 電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 216bp。陽性對(duì)照必須有此條帶出

現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無任何擴(kuò)增，否則實(shí)驗(yàn)無效。對(duì)沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，需要用通用引物（如真核生物專一 PCR 引物，需自備）測(cè)試是否有抑制劑或樣品是否濃度達(dá)到 PCR 的要求，如果通用引物也擴(kuò)不出來，需要濃縮并再次純化 DNA 樣品，或者更換 DNA 提取方法，直到通用引物能夠擴(kuò)增出預(yù)計(jì)大小的片段。