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elisa試劑盒的用途及組織結(jié)構(gòu)
閱讀：482 發(fā)布時間：2019-8-5 elisa試劑盒的用途：
ELISA試劑盒的基礎(chǔ)是抗原或者抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或者抗體任然保持其免疫學活性，酶標記的抗原或者抗體即保留其免疫學活性，又保留了酶的活性，在測定時受檢標本（測定其中的抗體或者抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他的物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或者抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或者定量分析。由于酶的催化效率很高，間接的放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測定方法達到很高的靈敏度。ELISA可用于測定抗原，也可以用于測定抗體。
ELISA試劑盒的組成結(jié)構(gòu)：
一、血清：操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱量和肉毒素的試管。收集血液后，1000*g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心的分離。
二、血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
三、細胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
四、 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。
五、 保存：如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑盒成分
：
一、預包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T
二、 酶標記抗體: (30倍濃縮)HRP標記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 1
三、標準品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2
四、 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
五、顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
六、 標記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
七、終止液: 1N硫酸 12mL x 1
八、濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說明 1實驗所需器材(但試劑盒沒有提供) 酶標儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標準品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標記抗體和顯色劑)